【分析化学】高时空分辨单颗粒光谱显微成像.pdfVIP

分类号065卫强 密级 学校代码 !Q§垒2 学号盟!!Q2121Q5墨 高时空分辨单颗粒光谱显微成像 Resolution HighTempo—-spatialSingle Particle MicroscopicImaging 研 究 生 姓名——．赵 晒．—— 指导教师姓名、职称姚室垫数拯 肖：墨龌熬援 学 科 专 业 佥盘他堂一—— 湖南师范大学学位评定委员会办公室 二零一四年五月 摘要 由于贵金属纳米颗粒具有独特的局部表面等离子体共振性能，很 容易将化学或物理刺激以高效率的方式转变成光信号。因此，结合光 学显微成像技术所开发的高通量、非接触式无损探测手段，能够为详 细探讨单细胞、单分子层面上的重要化学生物学过程提供强大的技术 平台。基于等离子探针的光学成像方法的进一步发展和应用，将会在 化学和生物界带来许多令人振奋的结果。 在前人研究工作的基础上，本文主要开展了以下工作： 1．我们利用高精度时间分辨单颗粒跟踪方法，探索反式转录激 活蛋白(TAT)肽修饰的纳米载体在模型脂质双分子层上的非静电区 域的吸附和热运动行为。我们发现了现有假说不能解释的现象≯TAT 肽修饰的纳米载体在中性脂质膜上的横向和旋转运动会受限。通过活 化能半定量分析表明，纳米载体与脂质双分子层最初始的吸附过程中 需要多个弱键结合。因此，纳米载体表面TAT肽的多个位点与脂质 体相互作用会形成多肽．脂质体复合物(i：h女H：脂质域)。这种复合物 所形成的拉力会有效的限制纳米载体在流体膜上的热运动。这种现象 无法通过单个多肽的随机空间和构象分布来实现。这些有趣的发现可 以为人们更好的理解TAT肽修饰的纳米载体在细胞内的内在运输机 制提供更深刻的见解，并且为药物和基因在细胞内特定位点的有效释 放点燃了新的希望。 I 2．我们利用双波长暗场(D啪)显微成像技术，探索TAT肽 胞摄取TGNPs的主要途径是能量依赖的内吞过程，且根据时间相关 的动态空间分布信息并没有观察到主动的核靶向过程。我们还发现 子细胞中。对于活细胞的摄取机制和纳米载体在细胞内代谢过程的进 一步认识，能为提高靶向给药的效率提供深入见解。 3．许多有趣的物理化学过程都发生在液一固界面。全内反射照明 与单分子光谱一起为选择性研究接近这一界面的动力学过程提供了 一个强大的平台。利用这种技术，我们证明可以通过光诱导的方式调 节接近固液表层的罗丹明B分子的分布量，并且发现激光诱导下液 固表面排斥力会形成一种长程能量势垒从而调节染料分子的分布。在 几百纳米的液一固界面范围内，这个能量会限制单个分子的热运动。 因此，该现象可能可被广泛应用于基于光调制技术的分离技术的发 展，并且应用于筛选不同尺寸的纳米颗粒。 关键词：金纳米颗粒，反式转录激活蛋白肽，单分子，光学显微成像 ABSTRACT surface resonancefromnoblemetal The localized unique plasmon or stimulus facilitatesthetransductionofchemical nanoparticles physical into ina efficient the of opticalsig