人体直肠癌组织红外光谱特征研究.pptVIP

人体直肠癌组织红外光谱特征的研究 李兰权 2007021124 摘要:傅里叶变换红外光谱(FTIR)是一种测定癌变细胞的新方法,越来越广泛地被应用于蛋白质、核酸等生物大分子的结构研究上,同时已开始更深入地应用于研究细胞和 组织等更加复杂的体系。傅里叶变换红外光谱(FTIR)可以从分子水平上揭示肿瘤组织的特性,从而对病程进行预测,为肿瘤疾病的早期诊断展现了良好的前景。 自Herschel于1801年发现红外辐射现象以来,红外技术的应用如红外光谱分析已成为化合物、混合物、复杂材料鉴别与表征的常用手段。癌症是对人类危害极大的疾病之一,因此早期作出正确诊断将给患者的治疗和痊愈带来极其重要的影响。因此,人们一直在努力探索操作简便、实用、准确率高和费用低的鉴别方法。[1]如果采用傅里叶变换红外光谱法进行癌症的鉴别与诊断,不仅简便、快速、经济,而且是在分子结构层次上作出的判断,其准确率高。我们利用FTIR的高分辨手段,对正常人的直肠组织和直肠癌变组织进行了对比研究,此法可以通过谱图解析直接阐明引起谱图变化的主要原因,为肿瘤的早期诊断展现良好的前景。[2] 1.1仪器与试样 仪器:美国普尔肯·埃尔默(Perkin Elmer)公司生产的Spectrum one型傅里叶变换红外光谱仪; 昆山市超声仪器有限公司生产的KQ-500DE型超声清洗仪。 试样:直肠癌组织及正常组织样品均由中山大学第一附属医院。 1.2实验方法 将冷冻的直肠癌组织与正常直肠组织样品分别放在玛瑙研钵中研细后放入离心试管,用生理盐水浸泡,放在超声清洗仪超声振荡两分钟后离心分离,取其溶液涂在CaF2晶片上,随即在红外灯照射下干燥,供光谱分析用。将经上述方法处理后的样品放入傅里叶变换红外光谱仪的光路中于扫描范围4000-450cm-1、分辨率4.00cm-1、扫描速度在0.20cm/sec下作图。 2、结果与讨论 我们发现人的正常直肠组织和直肠癌变组织的红外光谱,存在着明显差别。 2.1蛋白质分子中N-H基团谱带的变化对直肠癌红外光谱的研究发现,直肠癌组织不同于其他癌变组织的一个特点是蛋白质分子中氢键化的NH基团谱带的变化。[4]如图1所示,位于3420和3230cm-1附近的两个谱带源于蛋白质中氢键化的NH基团的伸缩振动模式。发生癌变时,3230cm-1谱带稍向低波数位移。位于3420cm-1附近的谱带,位移到3410cm-1以下,比正常直肠组织低10cm-1以上。这明与正常组织相比,癌变组织中的蛋白质分子的NH基团的氢键化程度加强。 2.2蛋白质分子中νC-0(H)谱带的变化 对直肠癌红外光谱的研究发现,正常直肠组织,νsC-O(H)谱带在1042cm-1附近呈现吸收而癌变组织的该谱带位移到1064cm-1附近,如图2所示这说明在癌变细胞和组织中,原先参与氢键作用的蛋白质的C-O键减少,氨基酸残基C-OH基团的结合氢键大部分遭到破坏,谱带向高波数位移。[3]它主要归属于蛋白质中的丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸残基的C-O(H)伸缩振动。 2.3其他谱带变化 在直肠癌组织的红外光谱中于670cm-1-450cm-1处有一明显的指纹区,这可能是由于磷酸化蛋白和核酸的磷酸单酯二价阴离子的对称伸缩振动所致。对介于正常和癌变细胞之间的发育分化异常细胞,它们的红外光谱与癌细胞的红外光谱呈现出基本相同的变化趋势,这反映了谱图变化与癌变的发生、发展过程的相关性与对应性,充分显示出傅里叶变换红外光谱法可能用于癌症早期诊断的美好前景。 3、结论 3.1癌变组织的光谱中,位于1042cm-1的蛋白质的νsC-O(H)谱带明显向高波数位移,说明癌组织中的分子间氢键大部分受到破坏。 3.2在癌变组织的光谱中位于3420cm-1附近的νN-H谱带向低波数位移,说明蛋白质分子内的N-H…OC氢键化程度增强。 3.3在癌变组织的光谱中670cm-1-450cm-1处有一明显的指纹区,该指纹区的确切类型和来源有待于进一步研究。 4.肿瘤红外光谱诊断前景展望 所有疾病过程如细胞的癌前病变都伴随着被感染细胞、组织或器官的生物化学变化,而这些分子水平上的变化一般早于细胞形态学方面的变化和机体症状的出现,任何一项能反映这些变化的技术在原理上都可以作为一种疾病的早期诊断工具。[5]而红外光谱正是检测这些变化的有效手段之一。FTIR可提供有关分子结构的多种信息,可用来进行肿瘤的临床早期诊断、 癌变的筛查或普查、治疗方案的设计、预后评估和病变过程的跟踪或病变的分子基础的探讨。可克服传统、常规的肿瘤检测方法的不足,如主观随意性大、操作繁杂、费时、不准确。 利用FTIR研究癌组织和正常组织的谱图表明癌组织样品与正常样品的红外光谱谱图解析可直接或间接地阐明引起谱图变化的主要原因,