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第四届中华骨科杂志论坛天津·2012 五种多孔生物陶瓷支架动物体内肌肉植入研究 济南军区总医院骨病科 许锋王 于秀 王林林开利常江 所有生物活性陶瓷具有骨传导性，必须与宿主组织紧密接触。生物活性陶瓷本身是不具备骨诱导性的。 很多研究报道多孔钙磷陶瓷植入犬、 、 、 、兔、鼠的非骨性部位(如肌肉和皮下)有骨诱导出现， 不同的结果可能是因为动物种属间的差异和植入物差异。多孔生物玻璃植入动物肌肉中也出现成骨现象。 多孔硅酸钙植入动物肌肉的生物学反应未见报道。 硅对新骨形成和骨修复的影响受到重视已有许多年。1970年，Carlisle首先指出，硅的缺乏会导致异常 的骨形成。研究表明，生物活性玻璃和玻璃陶瓷中硅促进成骨，与成骨细胞增殖和基因表达(包括BMP-2)的 明显提高有关。同样含有硅，硅酸钙是否会有上述研究的现象呢? 本研究的目的，就是评价五种多孔玻璃／陶瓷植入动物肌肉后的生物学反应并比较其体内降解性，并 对感兴趣的现象进行讨论。 l实验过程 1．1材料制备 孔剂工艺烧结制备得到多孔Bioglass、B—TCP、HA、B-CS、a-CS支架(详见第一部分材料制备)。将制备 好的样品单个双层塑封分装， 射线照射18h后备用。 1．2材料特征分析 所得五种多孔支架自然断面采用扫描电子显微镜(ShimadzuEPMA一8705QH 射情况采用射仪(Geigerflex，RigakuCo．，Japan)分析。采用阿基米德法测量多孔支架孔隙率。 采用津生物力学机，以0．5,．n／min加载速率测试多孔支架的最大压缩强度。每种支架测试5个样品孔 隙率和最大强度后取平均值使用。 1．3动物植入实验 选用第四军医大学实验动物中心提供的健康的、进食水正常的3月龄家兔12只，体重2—2．5kg，雌雄 背部棘突正中6cm长皮肤切口至背部肌肉层，钝性分离肌肉呈囊袋状后分两侧置入5种支架材料各1个， X 逐层缝合肌肉、筋膜和皮肤。术后肌注青霉素40万U／d3d。 1．4 X线观察分析 3．0软件(UTHSCSA，USA)测量灰度值，并做统计学处理。 利用Imagetool 1．5 Micro-CT扫描分析 Locus 植入0、16周后取材标本各1个置于扫描容器(15mm)中进行Micro—CT(eXploreSP，GE)扫 ABA 描分析，扫描条件为80kVp一80mA。三维重建后采用系统自带软件(Microview2．i．2，GE)定义材料cT MaterialVolume 值，获得残余材料体积百分数(Residual 分比，以反应材料的降解性，同时重建残余材料的三维图像。 1．6组织学观察分析 SP 100％)脱水，聚丙烯酸甲酯包埋，采用Leica1600硬组织切片机切片，厚度约200啪，之后研磨抛光 至50胁。Van-Gieson(V-G)染色后进行光学显微镜观察(LeicaDMLA)和图像分析(SimplePCI)。选 用中心的两张连续切片进行组织学观察和残余材料的形态半定量分析，残余材料百分比 459． 第四届中华骨科杂志论坛天津·2012 =荔㈣‘l。。％，以此来表征材料的降解情况。 1．7扫描电镜(SEM)观察和X线能谱分析(EDX) 植入2周后取材标本，去除表面覆盖物，显露材料，5％戊二醛固定，30、70、100％梯度乙腈脱水干燥、 ChainReaction，RT—PCR) 1．8反转录PCR(Reverse-TranscriptionPolymerase 1．8．1主要仪器和试剂