CETP基因I405V多态性与海南百岁人群长寿的相关性.pdfVIP

张云霞等 CETP基因I405V多态性与海南百岁人群长寿的相关性 第 l6期 CETP基因I405V多态性与海南百岁人群长寿的相关性 张云霞 周代锋 王 颖 耿秋月 杨文明 李美英 焦解歌 (海南医学院生物化学教研室，海南 海 口 571101) [摘 要] 目的 了解海南人群CETP基因I405V突变位点多态性与长寿的相关性。方法 收集海南省276例百岁老人及301例健康对照人 群全血DNA，利用AS—PCR的方法检测CETP基因I405V突变位点的多态性 ，并利用SPSS13．0对检测结果进行统计学分析。结果 1405V基因型及 等位基因频率分布在两组间存在显著差异 ( =31．954，P0．’001 =29．395，P0．001)。结论 CETP基因1405V突变位点多态性与海南长寿有 着显著关联，等位基因I可能与长寿密切相关，而突变型等位基因V可能对机体的衰老有促进作用。 [关键词] 长寿；百岁老人；CETP基因多态性 ；I405V突变位点 [中图分类号] R592 [文献标识码] A [文章编号] 1005-9202(2011)16-3011-03 基因与环境的共同作用决定人类的寿命¨qJ。随着对长 MgC12)中含模板 DNA0．2Ixg，引物各O．2～0．5 moL／L，4种 寿分子生物学机制的不断研究，诸多长寿候选基因被报道 J， dNTP各200Ixmol／L，TaqDNA聚合酶 (北京天根公司产品) 但在不同群体中重复度最高的仅有 FOXO3A和 APOE4]。胆 1U。PCR循环参数 ：首先在94℃进行2min热变性，随后进行 固醇酯转化蛋白(eholesterylestertransferprotein，CETP)也是长 32个循环反应(每个循环包括94℃50S，56 40s，72℃60s)。 寿候选基因之一，其主要功能是调节胆 固醇酯的逆向转运，从 扩增产物在2％琼脂糖凝胶中电泳，经 EB染色在 UVIband凝 而影响血清中低密度脂蛋 白(LDL)和高密度脂蛋 白(HDL)的 胶成像系统 (英国UVItec公司)中观察结果并照相。 水平及颗粒大小 。。CETP基因多态性与心血管疾病的发生 1．3．3 CETP基因PCR扩增产物的DNA测序验证 随机抽 发展密切相关 。TaqlB、1405V和 IM42G是CETP基因常见的 取上述PCR扩增后得到的各种CETP基 因型的DNA样本，送 突变位点，I405V多态位点位于 CETP基因第 14外显子 ，A／G 上海生工生物工程技术服务有限公司进行DNA序列测定。 的突变可使第405个氨基酸从异亮氨酸 I突变为缬氨酸V，是 1．4 统计学分析 采用SPSS13．0软件。基因频率采用基因 CETP基因最常见的突变位点。已有多项研究表明该位点与冠 计数法计算。研究对象与Hardy—Weinberg平衡的符合程度用 心病、动脉粥样硬化及阿尔茨海默病 (AlzheimerSdisease，AD) 检验。组间基因型与等位基因频率比较用 检验。 的发生发展密切相关 ’ 。关于I405V多态位点与长寿之间 关系的研究结果不尽相同 ”。本文以海南276位百岁老人 2 结 果 和301位健康对照为研究对象，进一步研究 I405V多态性与长 PCR扩增结果与基因型的判断见图1。每种 CETP基因多 寿的相关性。 态位点都利用突变型引物和野生型引物同时进行两管PCR扩 增。若只有正常引物能扩增 ，则提示无相应突变。若只有突变 1 材料与方法 引物扩增，则提示受检标本为突变的纯合子。若正常与突变引 1．1 对象 健康对照：无血缘关系的海南汉族健康个体301 物都能扩增，则提示受检标本为突变的杂合子。根据每个样品 名，肝肾功能正常，排除心血管疾病、糖尿病及血液病病史。长 两种等位基因扩增产物结果 ，可准确判定样品的基因类型。此 寿组：海南澄迈、万宁、秀英、五指山等地区共276名百岁老人。