N基因标记基因PCR检测方法的建立及其在遗传育种中的应用.pdfVIP

分子植物育种 ，2010年 ，第 8卷，第 1期，第 167171页 MolecularPlantBreeding，2010，Vo1．8，No．1，167—171 技术改进 UpgradedTechnology N基因标记基因PCR检测方法的建立及其在遗传育种中的应用 刘磊 1,2 郭兆奎 万秀清 -颜培强- 乔婵 刘丹 1牡丹江烟草科学研究所，牡丹江，157011；2黑龙江八一农垦大学植物科技学院，大庆，163319 通讯作者，guozhaokui@yahoo．tom．ca 摘 要 烟草的N基因是一个较为有效 的抗烟草花 叶病毒 (tobaccomosaicvirus，TMV)基 因，在抗病育种 中 发挥着重要的作用。为建立其标记基因PCR检测体系，评估已知 目的基因cDNA序列作为分子标记的 目的 基因辅助育种的可行性，本文依据N基因cDNA序列设计4对扩增范围在 150～950bp的不同片段长度引 物，并对含有N基因的coker176基因组DNA进行PCR扩增 。扩增结果表 明，有 3对可扩增出特异产物 。测 序结果表明，有 2对引物的扩增产物含有内含子。根据所获得的DNA序列设计出2对用于分子标记辅助育 种的引物，并分别对 C151、NC89、coker176等 l1个品种 的基 因组 DNA进行扩增，结果表 明在 coker