使用偏爱密码子大幅度提高苯丙氨酸脱氨酶在食品级乳酸乳球菌中的.pdfVIP

使用偏爱密码子大幅度提高苯丙氨酸脱氨酶在食品级乳酸乳球菌中的.pdf

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22 卷 2 期 生  物  工  程  学  报 Vol. 22  No. 2 2006 年 3 月 Chinese Journal of Biotechnology March  2006 使用偏爱密码子大幅度提高苯丙氨酸脱氨酶在食品级乳酸乳球菌中的   表达 High-level Expression of Phenylalanine Ammonia-lyase in Lactococcus Lactis Via Synthesized Sequence Based on Bias Codons 1 ,2 1 ,2 1 1 1 1 1 1 1 陈  星 , 高  斌 , 贾兴元 , 苏  畅 , 吕月平 , 王战勇 , 范新萍 , 肖  白 , 刘敬忠 CHEN Xing1 ,2 , GAO Bin1 ,2 , J IA Xing- Yuan1 , SU Chang1 , L Yue- Ping1 , WANG Zhan- Yong1 , FAN Xin- Ping1 , XIAO Bai1 and LIU Jing- Zhong1 1 首都医科大学附属朝阳医院基础医学研究中心 , 北京  100020 2 首都医科大学 2003 级研究生 , 北京  100054 1 Beijing Chaoyang Hospital Affiliate of Capital University of Medical Sciences , Beijing 100020 , China 2 Master Graduate of Capital University of Medical Sciences , Beijing 100054 , China 摘  要  为获得苯丙氨酸脱氨酶 (PAL) 在食品级乳酸乳球菌中的高效表达 , 将欧芹 pal cDNA ( pal nat ) 及根据乳酸乳球菌 偏爱密码子设计人工合成的 pal 基因 ( pal art ) 重组并转化到两种乳酸乳球菌 NICE 诱导表达系统中 , 测定基因工程菌表达 PAL 酶的量及活性 , 对比分析密码子偏爱性对乳酸乳球菌表达外源蛋白的影响。结果表明 : 在两种乳酸乳球菌 NICE 表达系 统中 , 使用偏爱密码子均可显著提高 PAL 酶的表达效率 , 使NZ9000pNZ8048 表达系统表达量提高 2223 倍 , NZ3900pNZ8149 系统提高 3590 倍。此研究获得了安全高效表达 PAL , 可用于治疗苯丙酮尿症的基因工程菌。 关键词  苯丙氨酸脱氨酶 , 乳酸乳球菌 , NICE 表达系统 , 密码子 中图分类号  Q786   文献标识码  A   文章编号 (2006) Abstract  To construct a safer and more efficient gene engineering Lactococcus Lactis for expressing phenylalaine ammonia lyase ( PAL) which will be benefit

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