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7·54 · Ch inese Journal of Reparative and Reconstructive Surgery, 2006, V o l 20 (7)
组织工程皮肤种子细胞的同期快速分离
1 1 2 1 1 1
杨斌 洪清琦 徐令 丘 日升 张琳 董月桐
【摘 要】 目的 寻找一种快速可行的同期分离组织工程皮肤种子细胞——表皮细胞及成纤维细胞的方法。
方法 取手术切除包皮, 利用 型胶原酶结合胰蛋白酶消化法, 同期分离表皮细胞及成纤维细胞, 观察细胞形态。对表皮
细胞及表皮干细胞行 、 19 荧光免疫染色及 19 流式细胞仪鉴定; 对成纤维细胞行波形蛋白 免疫
PAN F ITC K F ITC K F ITC
荧光鉴定。并分别对两种细胞培养7 d, 观察其生长情况。 结果 应用 型胶原酶结合胰蛋白酶, 在3 h 内快速分离得
到表皮细胞及成纤维细胞, 免疫荧光染色表皮细胞 染色均为阳性、 19 染色部分阳性, 流式细胞仪鉴
PAN F ITC K F ITC
定其 19 阳性表达的细胞接近 17% 。表皮细胞培养48 开始呈克隆样增长, 至7 生长停滞, 向终末的角细胞分化。成
K h d
纤维细胞体外培养7 可扩增100 倍, 波形蛋白 免疫荧光染色呈阳性。 结论 利用胶原酶结合胰蛋白酶消化法可
d F ITC
在3 h 内同期分离到用于构建复合型组织工程皮肤的种子细胞, 为复合组织工程皮肤的快速构建提供了可能。
【关键词】 组织工程 皮肤 表皮干细胞 快速分离
中图分类号: 318. 08 8131 文献标识码:
R Q A
,
FAST HARVEST OF SEED CELL S FOR COM POSITE TISSUE ENGINEERED SK IN AT ONE TIM E YA N G B in
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H ON G Q ing qi X U L ing et al D ep artm ent of P
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