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农业生物技术学报 Journal of Agricultural Biotechnology 2003,11 5冤院 520~524
·研究论文·
无花果曲酶植酸酶基因 的克隆、序列分析及表达*
1,2 1 1 3 1 1 1 1 1
桂兰 祝建洪 孙 建 吴作为 王隆飞 晏 晶 陈 功 姜洪州 李明刚 **
（1. 南开大学分子生物学研究所，天津300071 ；2. 河北职业技术师范学院，昌黎066600 ；
3. 云南大学云南省工业微生物发酵重点实验室，昆 650091 ）
： （ ，并将其克隆
摘要 用RT-PCR 方法从无花果曲酶 3.4322 ）中扩增出 1 条约 1.4 kb 的特异性条带 到
pMD 18-T 载体中。DNA 序列测定表 ，目的片段为不含信号肽的植酸酶编码序列，全长 1 347 bp ，编码448 个氨基酸。该基因
序列已在GenBank 注册（注册号为 ：AF537344 ）。将该 因克隆到酵母表达载体pYES2 中，构建成不带信号肽 因的
重组表达载体pYPA2 。用醋酸锂法将pYPA2 转进Ura 缺陷型的酿酒酵母（ INVSc1 ），筛选获得含植
酸酶 因的酵母转化子。经半乳糖诱导表达后，用磷钼蓝显色（AMES ）法对酵母菌体进行酶活性测定，测出了明显的植酸酶活
性，pYPA2 胞内植酸酶活性约 11.55 U/L ，表 无花果曲酶 基因能在酿酒酵母中表达。
： ；植酸酶； ；表达
关键词 无花果曲酶 因；酿酒酵母
Cloning, Sequence Analysis and Expression of the
Phytase Gene from
Li Guilan1，2 Zhu Jianhong1 Sun Jian1 Wu Zuowei3 Wang Longfei1 Yan Jing1 Chen Gong1
1 1
Jiang Hongzhou Li Minggang **
( 1. Institute for Molecular Biology, Nankai University, Tianjin 30007 1, China ；
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