利用错配碱基引物的ASO-PC R检测小麦赤霉病菌对多菌灵中抗菌株Codon200TTC→TAC基因型.pdfVIP

利用错配碱基引物的ASO-PC R检测小麦赤霉病菌对多菌灵中抗菌株Codon200TTC→TAC基因型.pdf

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植物病理学报 ACTA PHYTOPATHOLOGICASINICA 41(3):278-284(2011) 利用错配碱基引物的ASO—PC R检测小麦赤霉病菌对 n200 多茵灵中抗菌株CodoTTC。TAC基因型 陈长军,蔡倩,王建新,周明国’ (南京农业大学植物病理学系,南京2toogs) 摘要:采用在引物3’端引入错配碱基,建立了特异性检测小麦赤霉病菌对多菌灵中抗菌株(Coton”o11C川AC)基因型的 RI/NT-7Err5 ASO—PCR分子检测技术。结果表明含有错配碱基的引物对NT-7 F能够特异性检测小麦赤霉病菌对多菌灵 的中抗菌株(Codon”oTTC_TAc),扩增条件为94℃预热5rain;94℃变性60S,56℃退火60S,72℃延伸60S。35个循环; 最后72℃延伸15 min。并利用26种常见植物病原真菌验证了所设计引物的PCR扩增特异性。整个检测过程快速,操作 简单,结果准确,在6小时内完成。 关键词:小麦赤霉病菌;多菌灵抗药性;ASO.PCR检测;Codon”o11[℃一1.Ac基因型;错配碱基引物 AS0一PCR the withmismatchestodetect carbenda. amplifiedby primers moderately zim—resistant Fusariumasiaticum CHEN genotype(codon200TTC_÷TAC)of Changojun。 CAI ofPlant Qian,WANGJian-xin,ZHOU Ming—guo(DepartmentPathology,NanjingAgriculturalUniversity。Nan- jing210095,China) allele Abstract:An mismatchesatthe3’terminalofthe specificoligonucleotide-PCR(ASO-PCR)with wasset todetect primer up moderatelycarbcndazim(ⅧC)-resistant sariumasiaticum.Theresultsshowedthata of R1/NT一7Err5Fwith pairprobe,NT一7 mismatcheswasdevc— to detect MBC—resistant ASO—PCR lopedsuccessfullymoderately isolates(Codonzoo’nC—}’n虻).,nle ampli— ficationMBC刚一/MBC砌BWasconductedwiththe initial at940Cfor by followingparameters:anpre—heat 5 35 ofden

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