胰腺癌肿瘤干细胞对抗肿瘤药物敏感性的实验研究.pdfVIP

胰腺癌肿瘤干细胞对抗肿瘤药物 敏感性的实验研究 王育和 李非 刘 爽孙海晨 崔叶青 [摘要] 目的 探讨胰腺癌肿瘤干细胞对抗肿瘤药物的敏感性。方法 FACS技术分选人胰腺 癌PANC-1细胞；RT-PCR技术检测分选PANC-1细胞中CD133、ABCG2、Notch1的表达情况；MTT 法检测分选细胞对抗肿瘤药物5-氟尿嘧啶和吉西他滨的耐药性。建立分选细胞的移植瘤模型，随机 分为吉西他滨治疗组 （n=3）和对照组 （n=3），观察肿瘤生长情况，作CD133免疫组化染色。结果 PANC-1细胞中含有SP亚群。SP细胞CD133、ABCG2、Notch1的mRNA的表达明显上调，non-SP 细胞的表达量显著低于前者。在吉西他滨的干预下，SP细胞和non-SP细胞的OD值差异有统计学 意义。而5-氟尿嘧啶的干预(10μg/ml和100μg/ml)则没有显著差异。移植肿瘤治疗组中CD133 阳性细胞明显多于对照组(P=0.001)。结论胰腺癌中存在SP亚群细胞。胰腺癌PANC-1的成瘤 能力是由其中的SP亚群细胞决定的，而并非所有胰腺癌PANC-1细胞。胰腺癌肿瘤干细胞对抗肿 瘤药吉西他滨具有较高耐药性。 胰腺癌；干细胞；耐药性 SensitivitytodrugsofchemotherapyofcancerstemcellsofhumanpancreaticcarcinomaWANG Yu-he LIFei LIUShuang SUNHai-chen CUIYe-qing DepartmentofSurgery,BeijingXiaotang- shanHospital,Beijing102211,P.R.China [Abstract] Objective Toexplorethesensitivityofcancerstemcellstochemotherapyinhuman pancreaticcarcinoma.Methods PANC-1ceilswereculturedinanincubatorfilledwith5％ CO2ata temperatureof37℃,andwerelabeledwithHoechst33342.TheSPanalysisandsortingwereper formedusingaFACSVantageSE.RT-PCRwasperformedtodetecttheexpressionofhumanCD133 ABCG2andNotch1.SPandnon-SPcellsfromthePANC-1celllineweretreatedwith5-fluorouracil (5-FU;1,10,or100μg/ml)orgemcitabine(10,100,or1000μg/ml),andthecellviabilitywasde terminedusingtheMTTassay.Thesensitivityofsortedtumorcellstochemotherapeuticswasdeter minedinNOD/SCIDmicemodel.Results SPcellswerefoundtohavehigherdrug-resistancebothin vivoandinvitroandhigherlevelsofmRNAexpressionforCD133,ABCG2andNotch1,whencom paredtonon-SPceils.ThexenograftedtumorsderivedfrominjectedSPcellsandtreatedwithgemcit abinehadmoreCD133± cellsthantheuntreatedgroup.Conclusions TheSPofPANC-1pancreatic carcinomacellsareenrichedwithhighlygemcitabine-resistantCSCsanddeterminethecarcinogenesis ofthePANC-1pancreaticcarcinomacells. Pancreaticcarcinoma;Stemcell;Drugresistance 10.3760/cma.j.issn.1007-8118.2011.11.015 102211北京小汤山医院外科 （王育和） 首都医科大 学宜武医院普外科 （李非、刘爽、孙海晨、崔叶青） 万