生防菌菌株A的诱变、发酵工艺优化及剂型研制和应用.pdfVIP

生防菌菌株A的诱变、发酵工艺优化及剂型研制与应用 摘 要 No．1982)为出发菌株，采用氯化锂和紫外线 本研究以枯草芽孢杆菌菌株A(CGMCC 复合诱变处理，获得了遗传稳定、拮抗效果高的诱变菌株J4．1。以诱变菌株为材料，研 L)研究了发酵过程中培养 究了不同液体培养基条件下菌株的生长规律，利用发酵罐(20 基残碳、残氮、溶氧、pH的变化规律，最终确定了生防菌株发酵生产的工艺参数，为实 现生防菌的产业化奠定了基础。以获得的发酵液为原料，开发出蔬菜大棚专用生防菌剂、 水果专用防腐保鲜纸(袋)等剂型。同时在实验室和刚fbJ对生防菌剂的防病、保鲜效果进 行了试验，结果表明：开发的剂型在实验室和F日间对蔬菜主要病害均有良好的防治效果， 研制的生物保鲜纸对梨、葡萄均有较好的防腐保鲜效果。具体研究结果如下： l、以枯草芽孢杆菌菌株A为出发菌株，玉米小斑病菌为指示菌，采用氯化锂紫外线 复合诱变处理，经过4次诱变，得到了高拈抗活性诱变菌株J4．1，拮抗活性与出发菌株相 比提高了64．5％，且具有良好的遗传稳定性。 2、采用币交试验设计，对诱变菌株最适碳氮源进行优化，得到发酵培养基配方： 2％，水补齐。根据菌体在 葡萄糖1％，蔗糖3％，蛋白胨酵母膏复合物3％，(NH4)2S04 h， 发酵培养基中的生长曲线，发酵过程中pH、残糖、残氮变化曲线将发酵周期延长至42 3、研制开发出生防菌剂全发酵液液体剂型，主要成分有：0．2％o凯松、0．1％尼泊余 甲酯、1％吐温一20、0．5％山梨醇、pH值8，其余全发酵液补齐。 采用灌根、喷施方法对生防菌液的防病效果进行了田间试验，结果表明： (1)菌液对温室大棚青椒枯萎病的防治效果显著高于正常管理(化学农药)；对白粉病 的防治效果接近正常管理。 (2)菌液对温室大棚黄瓜褐斑病防效与『F常管理(化学农药)差异不显著。 (3)菌液对温室大棚番茄灰霉病的防效可达正常管理(化学农药)的65％以上。 (4)菌液对大田葡萄褐斑病、霜霉病的防效与喷施化学农药的『F常管理区无显著差 异。 4、研制开发出生防菌水果防腐保鲜纸(袋)。将发酵液均匀涂佰于市售包装纸上，菌 体含量为(4．624-0．293)×108cfu／cm2左右，用于水果防腐保鲜。将发酵液均匀涂布于水果 cfu／cm2，用于水果生产套袋。 套袋上，菌体含餐为：(3．39_+0．323)x109 用水果防腐保鲜纸进行梨保鲜试验，结果显示：常温下保存45d后，防腐保鲜纸处 理梨的失重率为26．84％，烂果率为13．33％，均显著低于对照，防腐保鲜效果明显。 用水果防腐保鲜袋对大fH葡萄果实进行套袋，结果表明：对葡萄果实炭疽病的防效 接近喷施化学农药的正常管理。 关键词：生防细菌枯草芽孢杆菌复合诱变发酵工艺杀真菌刺剂型防效 AB STRACT the Bacillussubtilisstrain Treatingoriginal No．1 A(CGMCC 982)bycompound mutmionofLiCIandultraviolet bacterialstrainwithwell radiation，amutagenesis genetic and