B-Myb 稳定过表达H1299 细胞株的构建与分析.pdfVIP

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2017-08-28 发布于福建
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中国细胞生物学学报 Chinese Journal of Cell Biology 2014, 36(6): 732–739 DOI: 10.11844/cj cb.2014.06.002 1 B-Myb稳定过表达H1299细胞株的构建与分析 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 蔡伟王义涛朱远远王森朱慧芳雷云龙 1,2 1,2 1,2* 1,2* 李轶张莹张春冬卜友泉 1 2 ( 重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室, 重庆400016; 重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心, 重庆400016) 摘要 B-Myb是Myb 家族的成员之一, 在细胞周期和癌变过程中具有重要作用。但其在肺癌 B-Myb B-Myb 中的作用及其分子机制仍不清楚。为了研究在肺癌中的作用, 构建了稳定过表达的 H 1299肺癌细胞株。流式细胞术和MTT检测的结果表明, B-Myb稳定过表达导致G 期细胞减少, S 1 期细胞增加进而促进细胞增殖; 克隆形成实验及Transwell的结果表明, B-Myb稳定过表达显著增强 H 1299细胞的克隆形成、侵袭及迁移能力。定量RT-PCR检测结果表明, B-Myb稳定过表达显著提高了细胞周期基因CCNA1的表达水平; 对CD97和MTSS1 等细胞运动相关下游基因的表达则无明显 B-Myb B-Myb 影响。该研究成功构建了稳定过表达细胞株, 发现了过表达可促进肺癌细胞的增殖、侵袭迁移及克隆形成能力, 为进一步研究奠定了基础。关键词 B-Myb ; 细胞周期; 细胞增殖; 侵袭; 迁移; 肺癌 Establishment and Analysis of Lung Cancer Cells H1299 with Stable B-Myb Over-expression Cai Wei1,2, Wang Yitao1,2, Zhu Yuanyuan1,2, Wang Sen1,2, Zhu Huifang1,2, Lei Yunlong1,2, Li Yi1,2, Zhang Ying1,2, Zhang Chundong1,2*, Bu Youquan1,2* 1 ( Department of Biochemistry and Molecular Biology, ChongQing Medical University, Chongqing 400016, China ;