猪繁殖与呼吸综合征病毒与副猪嗜血杆菌混合感染的诊治.pdfVIP

·90· Animal Medicine2010V01．42No．4 Husbandry＆Veterinary 猪繁殖与呼吸综合征病毒与副猪嗜血杆菌 混合感染的诊治 谭实勇1，邓瑞林2，罗满林h (1．华南农业大学兽医学院，广东广州510642； 2．广东华农温氏畜牧股份有限公司，广东新兴527400) 摘要：通过对某猪场出现的疫情进行流行病学调查、临床症状、病理剖检、细菌分离培养鉴定及荧光定量PCR诊断，确诊为猪繁殖与呼吸综合 镜检、卫星现象及PCR检测，确定分离菌为副猪嗜血杆菌。药敏试验结果表明该分离株对先锋Ⅵ、阿莫西林、壮观霉素、庆大霉素均敏感。采 用PRRSV核酸检测试剂盒对病料进行检测结果为阳性。综合判定该场为PRRSV和HPS混合感染。 关键词：PRRS矿；HPS；PCR；药敏试验 中图分类号：s855 文献标识码：B 文章编号：0529．5130(2010)04—0090—03 re— 情况。 副猪嗜血杆菌作为猪呼吸道综合征(porcine disease 1．3 PCR检测 spiratorycomprex，PRDC)主要的继发性感染 的细菌病原，近年来引起的发病率越来越高，特别是 将分离纯化的菌株用接种环刮取菌落洗脱于含 100 在猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪圆环病 中水浴10min，冻融及离心取上清作模板。根据副猪 毒2型(PCV-2)感染后，几乎总是伴随着副猪嗜血 嗜血杆菌16S 杆菌(HPS)的感染【1。2J。2009年4月初，广东某猪 场保育猪食欲下降明显，体温41．5℃左右，腹式呼 GAAGGGTGGTGT-3’：HPS-P2：5’一GGCTTCG，rCAC· 吸或张口呼吸，个别猪明显咳嗽，耳尖、腹部及四肢 内侧皮肤有紫色斑块，用磺胺类药和氟苯尼考等药物 Buffer 2．5弘L，dNTPs(2．0 进行治疗效果很差。发病率约42％，累计死亡率为 (20 pmol／p。L)0．5斗L，P2(20pmoL／l-LL)0．5斗L， 19％。病理剖检濒死仔猪胸腔内积有大量混浊液体， 模板3．0IzL，rTaq酶(5U／斗L)0．25IzL，ddH20 有纤维素性渗出物，心外膜呈“绒毛心”，肺间质增 16．25 oC预变性5min；94℃ pLL。PCR反应条件：94 宽、水肿，呈间质性肺炎，气管和支气管内有大量带 变性30s，54oC退火30s，72℃延伸50s，共运行 泡沫的黏液。根据上述情况，我们进行了系统的实验 30个循环；72oC终延伸7min。同时设阳性和阴性对 室检查，现将诊断报告如下。 照。反应结束后取5肛LPCR产物于0．8％的琼脂糖 凝胶中电泳(0．5 EB)