高效液相色谱法检测鸡肉中的己烯雌酚.pdfVIP

日饲料检测 高效液相色谱法 检测鸡肉中的己烯雌酚 周德刚 ’ 贾 涛 孙志文 ’ 1．北京市兽药监察所 2．北京市饲料监察所 己烯雌酚为人工合成的非甾体雌激素，属于雌 1)甲醇 (色谱纯)。 激素及孕激素类药物。为无色结 晶或 白色结 晶粉末 2)乙腈 (色谱纯)。 状 ，无臭 ，溶于乙醇 、氯仿、乙醚、脂肪或稀苛性碱溶 3)正己烷 (优级纯)。 液，几乎不溶于水 。化学名称(E)一4，4一(1，2)一二乙基一 4)0．043mol／L磷酸二氢钠 (NaH2PO42·H20)溶 l，2一亚乙烯基双苯酚 ；分子式 C。。H ；相对分子质 液 ：称取磷酸二氢钠 lg溶于500mL超纯水 中。 量为 268．36。小量可刺激垂体前叶促性腺激素 ，大 5)磷酸 (优级纯)。 剂量抑制垂体前叶促性腺激素和催乳素的分泌 ，有 6)己烯雌酚标准溶液 抵消雄激素的主要作用 。并抑制催产素酶而增强催 a己烯雌酚标准品(纯度 ≥99．7％)，国家标准 产素的作用。不 良反应有恶心、呕吐、头晕及头痛 ， 物质 中心提供。 偶可出现皮炎症状。 b己烯雌酚 (DES)标准储备溶液 ：精确称取 己 1 对己烯雌酚监测的意义 烯雌酚标准品 100mg，用甲醇定容至 100mL棕色 己烯雌酚添加到产蛋鸡 日粮中主要起到提高 容量瓶 中，摇匀 。此溶液质量浓度为 1mg／mL，于一 产蛋率的作用 ．但 己烯雌酚却会残留在鸡蛋与鸡 肉 20℃避光保存 ，有效期为 6个月。 组织 中。人食用后会造成体 内激素失调 ，从而带来 c己烯雌酚标准中间溶液 ：准确吸取 己烯雌酚 对人体健康的危害 ，对鸡 肉中己烯雌酚的监测可保 标准储备溶液 10mL用乙腈定容至 100mL棕色容 障食 品安全工作 的顺利进展 ，从而保护人类 的身体 量瓶 中，摇匀 ；此溶液质量浓度为 100I~g／mL；，于一 健康与生命安全。 2O℃避光保存 ，有效期为 1个月。 2 检测原理 d己烯雌酚标准工作溶液 ：准确吸取己烯雌酚 鸡肉样品经均质器匀浆后 ，加入甲醇提取 ，合 标准中间溶液 10mL用乙腈定容至 100mL容量瓶 并提取液后负压真空旋转蒸干 ，残 留物经乙腈溶 中，摇匀 ；此溶液质量浓度为 10~g／mL，于 4℃避光 解 ，加入正 己烷除去脂肪 ，将乙腈过 0．2 m滤膜净 保存 ，有效期为 1周。 己烯雌酚标准工作曲线 ：准确吸取己烯雌酚标 化 ，注入 HPLC柱 中，经紫外检测器于波长230nm 处测定吸光度 ，同等条件下绘制工作 曲线 ，己烯雌 准工作溶液 3、6、9和 12mL分别置于 4个 100mL 酚含量与吸光度值在一定质量浓度范围内成正比， 容量瓶 中，用乙腈定容至刻度 ，摇匀 ；此工作曲线质 试样与工作曲线比较定量 。 量浓度分别为 。O．3、0．6、0．9和 1．2I~g／mL。 3 试剂 4 检测步骤 除非另有规定 ．这项方法所用试剂均为色谱 4．1 样品的提取与净化