鸡血中乙酰胆碱酯酶的提取研究.pdfVIP

第 1期 化 学 世 界 鸡血中乙酰胆碱酯酶的提取研究 周祖新 。 丁 蕙 。 周 萍 (上海应用技术学 院 化学与环境工程学院，上海 200235) 摘 要 ：选取新鲜鸡血为 乙酰胆碱酯酶的酶源．对其进行了高速 离心、透析、盐析和凝胶柱层析等分 离纯化。在 pH一7．5缓冲液 中，3O℃下保温 30min等最佳测试条件下，得到的酶活力为 U一 0．112(~／mol／min)，比活力 2．24。 关键词 ：鸡血 ；乙酰胆碱酯酶；透析；凝胶层析 中图分类号 ：00652．6 文献标志码：A 文章编号：0367-6358(2010)O1—0049—02 ExtractionofAcetycholinesterase(ACHE)from ChickenBlood ZHOU Zu—xin， DING Hui， ZH0U Ping (SchoolofChemicalandEnvironmentEngineering，ShanghaiInsitituteofTechnology，Shanghai200235，China) Abstract：Chick blood was selected as a source of enzyme，and the extraction and purification of acetycholinesterase(ACHE)bymeansofcentrifugal，salting-out，dialysisandgelcolumnchromatography werestudied．Theenzymeactivityvaluewas0．112(t~mol／mfn)，andtherateactivitywas2．24，whenthe buffersolutionofpH一 7．5wasused，thetemperaturewas30℃ ，andthetimeofheatpreservationwas30 m in． Keywords：chickenblood；acetycholinesterase；dialysis；gelcolumnchromatography 乙酰 胆 碱 酯 酶 (acetylch0linesterase，AchE， 中的残 留农药量 。目前常用 的方法是用滤纸或电极 EC3．1．1．7)是动物神经系统中最重要的酶系之一 ， 作为载体 ，将 乙酰胆碱酯酶 固定在上边 ，利用酶水解 其主要功能是将传导神经兴奋的化学物质乙酰胆碱 产物与显色剂显色或产物中酸碱性的变化来确定农 迅速水解为乙酸和胆碱 ，以维持神经系统的正常生 药残留量。因此 ，高灵敏度 、高纯度的乙酰胆碱酯酶 理功能[1]。反应式如下 ： 批量制备成为酶抑制法研究的重点问题 。乙酰胆碱 HO(CH3)3NCH2CH2OOCCH3(乙酰胆碱)+H20 酯酶的来源很多，动物的肝状 ，脑部 ，血液 中均存在 A r，L 较丰富的该酶源 ，作者曾分别用猪肝、麦麸、鲫鱼脑、 HO (CH。)3NCH2CH2OH (胆 碱 ) + 蚯蚓和鸡血来提取 乙酰胆碱酯酶 ，从提取得到酶的 CH3COOH 活性和大规模操作 的方便程度 ，用鸡血作为酶源有 有机磷 ，氨基 甲酸酯类农药对 乙酰胆碱酯酶 较大的优势。国内邱朝坤 [4曾做过从鸡血液中提取 (AchE)有 强 烈 的抑 制作 用 ，主要 是 它们 能够 与 乙酰胆碱酯酶 ，但只做了盐析 ，无提取出酶 的活性和 AchE的活性部位快速不可逆的结合，使酶失活 ，从