镉对中国林蛙（Rana+chensinensis）和黑斑蛙（Rana+nigromaculata）幼体生长发育影响.pdfVIP

chensinensis)和 镉对中国林蛙(Rana 黑斑蛙(Rana nigromaculata)幼体生长发育的影响 黄敏毅 摘要两栖动物幼体的生长发育过程对环境变化和化学污染物都很敏感，为研 究镉对两栖动物幼体生长发育的影响，将26～27期中国林蛙(R 直至完全变态，观察幼体生长发育过程，记录蝌蚪完全变念时间，解剖完全变念 的林蛙和黑斑蛙亚成体，取出性腺，分辨性别，统计雌雄比例和畸形率。用免疫 组的林蛙和黑斑蛙亚成体的肝中的分布，揭示ER、c-fos和MT与镉之间的关系， 探讨镉的激素效应机制和毒性机制。本文得到的主要结论如下： 1．将中国林蛀蝌蚪暴露在含不同浓度镉的自来水和去离子水中，观察毒性效 应。结果是，在室温下，中国林蛀蝌蚪在加入镉的自来水中饲养，24h的零致死浓 mg／L：48h的LCo、LCso、LCmo分别为2．64、5．14、8．25 56、3．67、5．96 LCl00分别为2 4．96mg／L，安全浓度(SC)为1．22meJL。在加入镉的去离子水中饲养，24h的LCo、 LC50、LCIoo分别为0．10、0．16、O．22 015、O．21 Lc0、LC50、LCl00分别为0．09、0．12、0．15 mg，L，SC为O．04mg／L。结果表明，林 蛙蝌蚪的死亡率随着镉浓度的升高和时阻j的延长而增高，镉对蝌蚪的毒性在去离 子水中比在自来水中更强。 2．用镉处理的26～27期林蛙蝌蚪、37～38期黑斑蛙蝌蚪，其平均全长和平 均体重的增民率随着镉浓度的升高而降低。统计镉处理的林蛙蝌蚪和黑斑蛀蝌蚪 90％完全变态所需时间，在林蛙，对照组和0．05、0．1、0．2、0．4 mg／L处理组，90％ I 05 ±4 d：在O mg／L处理组，蝌蚪完全变态时间与对照组之f刚的差异显著 (P0．05)；在0．1、0．2和0．4 mg／L处理组，完全变态时间与对照组之问的差异极 变念时间分别是41．1±5．3和40．8±4．6、40．3±6．4d，组问差异不显著(P0．05)； 在O．2和0．4 mg／L组，变念时间分别是49．9±7．4和72．8±7．5d，与对照差异显著 (P0．05)。结果表明，随着镉浓度的升高，蝌蚪的生长发育所受到的抑制越明显， 完全变态所需的时间越长。晚明镉可延迟蝌蚪的生长发育、干扰变态。 3．解剖变念后的对照组和处理组林蛙和黑斑蛙亚成体，观察性腺，统计雌、 雄个体数量，结果是：在林蛙，与对照组比较，O．05111∥L组雌雄比值增大：在O．】、 O．2和o．4 mg／L组，雌雄比值减小；部分林蛙亚成体的性腺出现异常现象。在黑斑 处理组的雌雄比值减小。结果表明，镉处理可以使林蛙和黑斑蛙幼体的性别比例 受到影响，说明镉影响了它们的性腺分化。 4．不同浓度镉处理26～27期林蛙蝌蚪，可诱导变态后的亚成体肢体出现畸 形，表现在蝌蚪尾部弯曲，变态过程中前后肢出现弯曲变形，肢体畸形主要是由 于关节出现畸形。推测镉可能干扰了林蛙蝌蚪肢体早期的发生过程。镉处理的37～ 38期黑斑蛙蝌蚪，变态后的亚成体肢体没有出现畸形，说明在该期后，镉对黑斑 蛙蝌蚪的肢体发生过程己没有明显的影响。 5．在林蛙和黑斑蛙，当O．05、0．1和0．2mg／L处理组的蝌蚪已经完全变态后， 停止对0．4mg／L处理组加镉，林蛙蝌蚪在36d±4．1d后90％完全变态，黑斑蛙蝌 蚪在23d+75 d后90％完全变态。说明停止镉对林蛙和黑斑蛙蝌蚪的处理，镉的 抑制作用可逆转，其生长发育过程可以恢复。 6．在雄性林蛙和黑斑蛙亚成体，比较对照组和镉处理组，肝细胞中均有ER 弱阳性。可见随着镉浓度的变化，ER反应的强度不同。说明镉干扰了林蛙和黑斑 蛀从蝌蚪到亚成体的内分泌的调节，使体内的激素受体水平发生了变化。 7．FOS在各组林蛙和黑斑蛙肝细胞中均有阳性表达，从O．05