罗布麻愈伤组织原生质体分离培养.pdfVIP

安徽农业科学，JournalofAnhuiAgri．Sci．2010，38(3)：1139—1140 责任编辑 夏静 责任校对 卢瑶 罗布麻愈伤组织原生质体分离培养 徐琴 ，王晓军 郝秀英 ，刘敏 ，康喜亮 ，波拉提 (1．巾同科学院新疆理化技术研究所，新疆乌鲁小齐 830011；2．新疆农业科学院微生物应用研究所，新疆鸟鲁术齐 830091) 摘要 [目的]探究罗布麻愈伤组织原生质体的分离培养及其影响因素 [方法]以罗布麻无菌苗子叶与下胚轴诱导的愈伤组织为材 料 ，研究MS培养基附加不同激素组合对原生质体分离培养的影响以及愈伤组织继代培养、不同浓度纤维素酶与离析酶组合、DPD和 MS等4种培养基对原生质体产量的影响。[结果]激素组合 中以6-BA0．5rag／L+NAA0．5me-／L组合获得最高愈伤组织诱导率，达 100％；用固体培养基进行继代培养的愈伤组织的原生质体产量高于液体培养基，尤其以从继代 1次愈伤组织收集的原生质体最为适 宜：纤维素酶0．30％+离析酶0．30％组合获得的原生质体产量最高，且细胞碎片较少；DPD培养基的原生质体较其他培养基的分裂得 早 ，MS培养基的培幂效果最差 [结论 l该研究为罗布麻遗传转化 、突变体筛选及体细胞融合育种提供 了技术途径 ： 关键词 罗布麻 ；愈伤组织；原生质体 中图分类号 S563．7 文献标识码 A 文章编号 05l7—661l(2010)03一O1139—02 PreliminaryStudyon theIsolation andCultureofProtoplastfron Apocynum venetum Callus XUQinetal (XinjiangTechnicalInstituteofPhysicsandChemistry，ChineseAcademyofScience，Urumqi，Xinjiang830011) Abstract fOl@cti~一eJ_rJ1estudyaimedtoexploretheprotoplastisolationandcultureofcallusjn pocynⅢ netumandthejnflueneefac— tors． M『ethod]Withcallusinduce(1rfomthecotyledonandhypocotytsinasepticseedlingsofA．venetum asmaterial，theeffectsofMSmedi— uinsupplementedwithdifferenthormonecombinationsoiltheprotoplastisolationandcultureandtheeffectsofthecallussubculture．different coneu．ofcellulaseenzymescombinedwith thenlaceralionenzynle，4kindsofculturemediumssuchasDPD andMSontheprotoplastyield wereresearched． 『Result]Hornlonecombinationwith6一BA0．5in L +NAA0．5fflg／Lcombinationreceivedthehighestcallusinduction rate，uptolOO％ ：Iheprotoplastyieldofthecalluscuhuretionsolidmedium forsubculturewashigherthanthatofthecallusculturedODthe liquklmediui11andspeciallvtheprotoplastscollectedfrolnthecallussnbcuhuredforoncewerelllOStsuitable．Theprotoplastyieldobtained withthecombinationofcellulaseenzvnle0．30％ + maeerationenzyme0．30％ wasthehighest．withthelesssegmentsofcells．Thedivision oftheprotoplastcuhuredOUDPDmediumwasearlierthanthatOilothermediumsandtheeuhureeffectofMSmedium wastheworst．fConclu— sion]Thisstudypro