组成型和可诱导型启动子驱动AtCDPK1过表达增强拟南芥对干旱和盐胁迫抗性.pdfVIP

摘 要 钙依赖蛋白激酶 （calcium-dependent protein kinase ，CDPKs 或CPKs ）是植物特 有的一类Ser ／Thr 型蛋白激酶。Ca2+是细胞内重要的第二信使，CDPK 作为Ca2+ 的受 体蛋白和效应蛋白之一，受生物以及非生物胁迫诱导激活，在介导植物生育信号和抗 逆信号转导过程中具有重要的作用。本研究用拟南芥野生型、35S::CDPK1 和 RD29A::CDPK1k 过表达转基因纯合体为材料，探讨拟南芥AtCDPK1 在非生物胁迫信 号转导途径中的作用。结果如下： 1、对本实验室已获得的35S 启动子驱动的AtCDPK1 过表达纯合体(35S::CDPK1)进一 步分析发现：在 150mM 的NaCl 处理下，35S::CDPK1 株系种子的萌发率明显高 于野生型对照组；约4 周苗龄的35S::CDPK1 株系在干旱以及高盐胁迫后，存活 率明显高于对照组，并且在受到胁迫后，野生型抽苔长度受到抑制，而35S::CDPK1 株系抽苔长度并未受到影响。 2 、干旱条件下，35S::CDPK1 株系中与干旱胁迫相关的一些基因表达量有所升高； 250mM 的NaCl 处理后，35S::CDPK1 株系中与盐胁迫相关的一些基因表达量有所 升高。 3、构建了RD29A 启动子驱动AtCDPK1 表达的载体RD29A::CDPK1k ，通过农杆菌介 导法将其转入野生型拟南芥，经庆大霉素抗性筛选，得到11 株转基因纯合体。干 旱处理后，用RT-PCR 检测基因表达量，发现AtCDPK1 基因在可诱导过表达中表 达量高于野生型。干旱以及高盐胁迫后，RD29A::CDPK1k 纯合体存活率比对照高， 耐受逆境能力增强。 关键词：拟南芥；CDPK1；RD29A 启动子；干旱；盐 Overexpression of CDPK1 Driven by Constitutive and Inducible Promoters Enhances Tolerance to Drought and Salt Stress of the Transgenic Arabidopsis Abstract CDPKs(calcium-dependent protein kinase, CDPKs or CPKs) are a family of serine/threonine protein kinases that are unique to plants. Calcium ions as one of the second messengers plays an important role in intracellular. CDPKs are receptor proteins and effector proteins of Ca2+ and were induced by biotic and abiotic stress. CDPKs have modulated many plant growth signals and various reactions, and play an essential role in the signal transduction pathways. In this study, we use Arabidopsis thaliana wild type, 35S::CDPK1 and RD29A::CDPK1k overexpression transgenic homozygote plants as materials, to provide the evidences that AtCDPK1 has important functions in Arabidopsis tolerance to drought and salt stresse