雏番鸭曲霉菌病的鉴别诊断与药敏试验.pdfVIP

浙江畜牧兽医 2010年第 1期 雏番鸭曲霉菌病的鉴别诊断与药敏试验 吴迂夫 ，诸 明涛 ，许怀正 ，张 闻 (余姚市舜昌动物医院，浙江余姚 315400) 中图分类号：$858．34 文献标识码 ：A 文章编号：1005—7307(2010)01—0026—002 余姚市某养殖户饲养雏番鸭500羽，10日龄开 马铃薯葡萄糖琼脂培养基培养结果：经培养24 始出现发病，临床上以气喘、咳嗽等呼吸道症状为主 h后，在培养基上形成隆起、放射状、圆形、白色菌 要特征 先后发病300多羽，发病率 60％，死亡 100 落；培养48h后，在培养基上形成中间墨绿色。周围 多羽，死亡率 20％。经余姚市某动物医院剖检、实 白色的放射状菌落，菌体背面中间成橘黄色；培养 验室诊断为烟曲霉菌引起的雏番鸭曲霉菌病。现总 72h后，整个菌体呈墨绿色，菌体背面呈黄褐色；乳 结报告如下。 酸酚棉蓝染色液镜检结果可见蓝色菌体，放射状菌 1 临床症状及剖检病变 体带有菌丝，符合烟曲霉菌的形态特点。 ． 病鸭主要表现为气喘、咳嗽等呼吸道症状，精神 2．5 染色镜检 用无菌手术刀割取小块单个真菌菌 不振，食欲减退，绒毛松乱。剖检病死鸭可见肺瘀 落置载玻片上，用50％酒精湿润整个菌落，30s后，蒸 血、水肿 ，有散在粟粒至绿豆大小的黄白色或灰白色 馏水细心清洗3次，稀释酒精后，用滤纸吸干，直接滴 结节，质地较硬。气囊壁上可见大小不等的干酪样 加乳酸酚棉蓝染色液数滴，覆盖整个菌落。2—3min 结节或斑块。气囊壁明显增厚，干酪样斑块增多。 后，盖上盖玻片，置显微镜下观察，可见分生孢子头短 肝脏肿大、瘀血，表面可见黄白色或灰白色结节。肾 柱状，浅蓝绿色至暗绿色，菌体壁光滑，近顶端渐粗 脏肿大、瘀血。 大，顶囊呈烧瓶状，绿色，小梗单层，较长布满顶囊表 2 实验室检查 面2／3，排列呈木栅状，无子囊(如图1和2)。 2．1 触片镜检 无菌操作采集心、肝、脾、肺和肾组 织触片，革兰氏染色镜检，未见致病菌存在。 2．2 细菌培养 无菌操作采集病死鸭肺、肝、脾、肾 组织，分别接种于普通琼脂、麦康凯和血琼脂进行细 菌培养，置37℃恒温箱，培养24～48h后观察，未见 致病菌生长。 2．3 压滴标本法检查 采集结节置载玻片上，由切 面刮取干酪样坏死组织，或 由病变组织表面刮取霉 菌斑，或用铂金针钩取纯培养物置载玻片中央，加乳 酸酚棉蓝染色液或生理盐水 1～2滴，用大头针撕开 图1 染成蓝色的曲霉茵 组织块或菌团，加盖玻片 (注意勿产生气泡)，制成 压滴标本。如果组织碎块较硬，可改用 20％氢氧化 钾(KOH)溶液 1～2滴，经火焰微微加温后压片。 可见染成蓝色的霉菌菌体。 2．4 分离培养法检查 取沙保劳(Sabouraud)氏培养 基和马铃薯培养基 (PDA)培养皿若干个(通常每份样 品各2个)，做好标记。无菌操作接种培养基后，将培 养皿放入37℃恒温箱内培养36h，可见菌落出现。 收稿 日期：2009—11-19 图2 曲霉菌茵体 2010年第 1期 浙江畜牧兽医 27 浅议动物卫生监督执法中的调查取证工作 张子明 ，吴春火 ，王素仙。 (1．仙居县皤滩乡畜牧兽医站，浙江 仙居 317300；2．仙居县农业局) 中图分类号