‘黄金冠’桃及其品系亲缘关系的RAPD分析.pdfVIP

· 试验研究 · 北方 园艺2OLO(I)：20～22 黄‘金冠’桃及其品系亲缘关系的ReMDD分析 冯 海 霞，孟 庆 杰，郭 尚敬，王 光 全 (聊城大学 生命科学学院，山东 聊城 252059) 摘 要 ：利用 RAPD技术对黄桃新品种 黄‘金冠’及其 它 6个品系的亲缘关系进行 了研 究。 从80个随机引物中筛选出15个重复性好、条带清晰的多态性引物对桃品系进行 了RAPD扩增， 共扩增出84条谱带，其 中38条表现多态性，多态性比率为45．2 。利用 NTSYS软件和UPG— MA聚类法对扩增结果进行了品种间相似系数的计算及聚类分析。结果表明：相似系数为0．78～ 0．86，黄桃 l9和其它桃品系亲缘关系最远，黄‘金冠’和锦黄 2号的亲缘关系最近 。 关键词：黄金冠；品系；亲缘关系；RAPD 中图分类号：S662．】 文献标识码：A 文章编号：1001--0009(2010)01—0O20一O3 桃起源于中国的西部地区．存我同的绝大部分地区 系．揭示 黄‘金冠’的起源，该试验对包括 黄‘金冠’在内的 和世界多个 国家均有分布，种质资源十分丰富。在桃树 7个黄桃品系进行Y。RAPD-PCR分析，并构建了遗传树 悠久历史的栽培过程 f【1，经过 长期的 自然选择和人丁驯 状 图对桃不同品种 问的亲缘关系进行了研究，为一些特 化栽培形成了众多的品种和类型。为了更好地发掘和 殊种质资源的开发利用及保存提供理论依据。 利用这些种质资源，探明桃属植物种质资源的亲缘关 l 材料与方法 系，很多学者用形态学、细胞学、酶学、孢粉学等方法对 1．1 试验材料 桃种质进行了分类研究 j。应用传统方法研究取得了 供试材料为7份黄桃品系．在2009年4月初采集材 一 些很有价值的成果，但是还存在很多问题尚待解决。 料嫩叶，采集地点是聊城大学科技同，样品贮于一80℃ 比如在这些研究中存在较多分歧，尤 其在桃 (Prunus 的超低温冰箱中备用。样品名称依次为锦黄 2号、锦黄 persicaL)种内品种群的划分上，至今仍未能统一，有必 3号、锦黄 4号、黄桃 19、黄金冠、锦绣和早风王。 要进一步研究。 黄‘金冠’是盂庆杰等LI{发现的黄桃新 1．2 试验方法 品种，它具有果 肉黄色、果皮及果核处无红色素等独特 1．2．1 基 阒组 DNA 的提取及纯度测定 取各品种嫩 优点。并且认为 黄‘金冠’和锦绣在生物学形状方面相 叶，采用 CTAB法 【提取基冈组总 I)NA，在提取缓冲液 似，但是利用分子标记手段的研究还未见报道。 中加入 3 的PVP和 2 的f3一巯基 乙醇，去除多年生果 近十几年来，由Welsh和Wiliam等 利用PCR技 树中的多糖和酚类物质。采厂fj0．8 的琼脂糖凝胶电泳 术发展起来的RAPD技术，具有技术简单、检测速度快、 检测DNA浓度，测定 DNA在 260Hill和280nm下的吸 只需少量 DNA样 品、不依赖于种属特异性和基 因组结 光值确定其纯度，于一2OC冰柜中保存备用。 构、～套引物可用于不同生物基因组分析和成本较低等 l_2．2 PCR反应体 系的建立 该试验通过在不同温 优点，在 同内外的桃、樱桃、苹果、杏、葡萄等J。一多种果 度、时间和离子浓度的PCR扩增，摸索建立了一套专 门 树中得到广泛应用。 适合桃品种 RAPIPCR扩增的程序。PCR的反应体系 为了进一步研究 黄‘金冠’和其它桃品种的亲缘关 如下，20肚I总体积中含不少于 5OngDNA模板，引物 (10mM )1