补骨脂素加长波紫外线诱导NB4细胞凋亡及对Fas／FasL基因表达影响的研究.pdfVIP

中国中西医结合杂志2010年 1月第 3o卷 期 cJ_r ，an !! !： ! !： · 45 · 基 础 研 究 · 补骨脂素加长波紫外线诱导 NB4细胞凋亡及对 Fas／FasL基 因表达影响的研究 向 阳 黄世林 陈楠楠 陈爱萍 摘要 目的 探讨 自中药补骨脂 中提取 的补骨脂素 (psoralen，PSO)加长波紫外线 (ultravioletA，UVA) 诱导人 白血病细胞 NB4凋亡及对 Fas／FasL基 因表达的影响。方法 以NB4细胞为研 究对 象，采用流式细 胞术、透射电镜 、定量PCR等方法观察不 同浓度的PSO，在不同时间的波长为360Fin的UVA照射 下，细胞凋 亡率、细胞超微结构 以及 细胞 Fas／FasL基 因、蛋 白表达水 平的变化。结果 (1)补 骨脂素加 长波紫外线 (PUVA)可诱导NB4细胞凋亡，当PSO浓度为 10、20、40、80Ixg／mL时，UVA照射 5min的细胞凋亡率分别 为(26．57±0．42)％、(30．67±0．11)％、(34．90-4-0．30)％、(24．63±0．38)％ ，凋亡率呈剂量 一时间依赖性 ， 两因素间有交互作用。(2)电镜下观察经 PUVA处理后的NB4细胞超微结构 ，可见明显的凋亡形态学改变 特征。(3)PUVA可上调 NB4细胞 Fas基 因、蛋 白的表达水平 ，并呈剂量一时间依赖性 ，在基 因水平两因素间 有交互作用，在蛋白水平两因素无交互作用。(4)PUVA可下调 NB4细胞 FasL基 因、蛋白的表达水平，并呈 剂量 一时间依赖性，且两因素间有交互作用。结论 PUVA可诱 导 白血病细胞 NB4发生凋亡，Fas／FasL系 统是 PUVA诱导 NB4细胞发生凋亡的作用途径之一 。 关键词 补骨脂素 ；长波紫外线 ；NB4细胞株 ；凋亡；Fas／FasL EffectofCombinedApplicationofPsoralenandUltravioletAforInducingNB4CellApoptosisandItsIm- pactonFas／FasLGeneExpressionsXIANGYang，HUANGShi—lin，CHENNan—nan，etalDepartmentofTradi— tionalChineseMedicine Hematology，The21OthHospitalofPLA，Liaoning(16021) ABSTRACT objective Toexploretheeffectofcombinedapplicationofpsoralen (PSO．anextractfr0m psoralea)andultravioletA (UVA)forinducingtheapoptosisofhumanleukemiccelllineNB4anditsimpacton theFas／FasLgene expressions．M ethods According to factorialdesign，changesofapoptosisrateand ultra— structureofNB4 cells，aswellasthegeneandproteinexpressionsofFas／FasLwereobservedaftercellswere treatedwithPSO indifferentconcentrationsandirradiatedbyUVAof360nm wavelengthfordifferenttimes，using flow cytometry，transmissionelectronmicroscopyandquantitativepolymerasechainreaction (PCR)，andthe outcomesweretreatedwithvariableanalysis．Results (1)AftertreatmentofPSO inconcentrationof10，20， 40，80Ug／mL combinedwith a 5-min exposureofUVA，the NB4 ceilsapoptosisrate induced were26．57％ ± 0．42％ ．30．6