水牛卵巢卵泡颗粒细胞凋亡生物学特征.pdf

水牛卵巢卵泡颗粒细胞凋亡的生物学特征 摘要 哺乳动物的绝大多数卵泡在其发疗过程L卜I闭锁退化，只有少数卵泡发育成熟 至排卵。虽然有众多学者对卵泡闭锁这一现象做了大量的研究，但就其机理方面 仍需进一步探索。本实验主要以水牛为实验动物进行了一系列的研究，主要包括 以卜内容： l、水牛卵巢健康卵泡和闭锁卵泡组织切片的光学显微镜观察、电子透射显 微镜观察、体外颗粒细胞的荧光显微镜观察。结果发现卵泡细胞凋亡的典型特性： 染色质凝聚、分块、位于核膜上，呈核固缩；胞质凝缩，细胞器聚集，镜下被浓 染；细胞膜皱缩，成不规则状；闭锁卵泡中有大量由完整膜包被的凋亡小体，分 布在卵泡膜细胞间隙和卵泡腔内；荧光显微镜下凋亡颗粒细胞呈明亮的蓝色，健 康细胞染色较淡。 2、在健康卵泡和闭锁卵泡中颗粒细胞的DNA电泳均不能看到“ladder”图 谱。健康卵泡颗粒细胞DNA链无断裂，电泳无拖尾发生，而闭锁卵泡颗粒细胞 DNA链有大量断裂，电泳下呈“smear”状。 3、用TUNEL法对水牛卵巢健康卵泡和闭锁卵泡中颗粒细胞凋亡频数的判 定，结果媪示在健康卵泡中几乎未见TUNEL阳性细胞，而在闭锁卵泡中有大量 的TUNEL阳性细胞，这也反映凋亡细胞(或坏死细胞)有很多DNA断口可被 阳性染色，颜色呈黑褐色。 4、Fas基因在水牛卵巢内的定位分析：颗粒细胞层、粒膜细胞层和基质内 均有Fas的表达，颗粒细胞层的Fas蛋白表达最多，闭锁卵泡比健康卵泡Fas蛋 门表达多。 关键词：细胞凋亡颗粒细胞卵泡闭锁Fas水牛 characteristicsof buffalo Biological ovarian follicular cells granulosa apoptosis Abstraet mostof follicles atresia Generally，the undergo and their degeneration during in afew mammals，andofthem tomaturation development only grow unimerruptedly undlovulation．The the mechanismof follicleatrisia stillremains unclear although studiesonthefollicleatresiahave many beenconductedresearchers．Inthis many by some