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提高蛋白质晶体质量的研究进展.pdf

· 104 · 材料导报 :综述篇 2010年 1月(上)第24卷第 i期 提高蛋白质晶体质量的研究进展 鹿芹芹,尹大川,刘永明,陈瑞卿,曹慧玲,解思晓 (西北工业大学生命科学院空间生物实验模拟技术国防重点学科实验室,西安 710072) 摘要 获得高质量蛋 白质晶体一直是 X射线衍射解析蛋 白质结构的瓶颈问题,因此研究提高蛋 白质晶体质量 的方法具有非常重要的意义。近年来人们从影响蛋白质结晶过程的各个因素出发,发展了一系列提高蛋白质晶体质 量的方法,如在亚稳区生长蛋 白质晶体、利用特殊环境影响蛋 白质晶体生长的动力学过程、利用去垢剂提高蛋 白质晶 体质量和分子工程改造蛋白质分子提高晶体质量等。分析和评述了这些方法影响蛋白质结晶过程的机理。 关键词 蛋白质 x射线衍射 晶体质量 ResearchProgressinImprovingtheQualityCrystalofProtein LU Qinqin,YINDachuan,LIU Yongming,CHEN Ruiqing,CAOHuiling,XIESixiao (KeyLaboratoryforSpaceBioscience Biotechnology,FacultyofLifeSciences。Northwestern PolytechnicalUniversity,Xi’an710072) Abstract Obtaininghighqualitycrystalofproteinhasalwaysbeenthebottleneckofstructuredeterminationby X-raycrystallography.Inrecentyears,crystaIlographershavedevelopedaseriesofmethodtOimprovethequalityof proteincrystals,suchascrystalgrowthinmetastablezone,influencingthekineticsprocessofproteincrystalinspecial environment,obtaininghighqualitycrystalsbyaddingdetergentandreductivemethylationofproteins.Inthispaper, theprincipleofimproving theproteincrysta1qualityisdiscussedandreviewed. Keywords protein,X-raycrystaUography,crystalquality 蛋 白质浓度等因素影响较大,而其它参数可能对蛋白质结晶 0 引言 的影响相对较小,但也起着重要作用。配位体或抑制剂的存 蛋 白质是生物体中含量最丰富、功能最多样的生物大分 在与否、盐或缓冲液的变化、温度E5]、去垢剂[6等影响因素都 子。蛋 白质功能的多样性 由其复杂的分子结构所决定,结构 需要考虑,同时还包括重力 7『]、电场[、磁场[、油[]、凝 的多样性保证 了功能的多样性 。只有深入 了解蛋 白质 的结 胶[]、逆扩散㈨ 、摇动 ”等因素。 构才能真正理解其功能及其分子作用机理。目前,x射线衍 影响蛋 白质结晶的因素虽然很多,但是这些 因素对蛋白 射技术是确定蛋白质分子三维结构最可靠的方法,而此方法 质结晶的影响都可以归结为 2个基本问题 :(1)对可否结 晶 的实施需要以高质量的蛋 白质晶体为研究对象。根据结构 的影响;(2)对晶体质量的影响。这 2个 问题也是蛋 白质结 基因组计划项 目的统计数据,从高度纯化的蛋 白质开始,到

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