T细胞亚群、金属元素作为胃癌复发转移影响因素的探讨及其相关性与研究.pdf

中文摘要 T细胞亚群、金属元素作为胃癌复发转移影响因素的 探讨及其相关性研究 摘 要 目的： 病程、家族史的角度探讨胃癌复发转移的影响因素，同时分 析T细胞亚群比例、金属元素含量与正常对照组相比有无显 著差别，并讨论两者有无相关性，从而发现金属元素的含量 与机体免疫功能状态是否存在内在联系。 材料： 随机选取胃癌患者60例为研究对象，男性32例，女性 28例，中位年龄67岁。其中有复发转移者36例，无复发转 移者24例。全部患者均经活检或术后病理检查确诊。按20 理、CT两项中至少一项证实。其血液标本均为入院前常规 检查所取，取血前三周内未行放化疗及免疫等其他治疗，并 排除其他相关疾病。患者静脉取空腹血4m1分别置于两支试 管中，其中一管lml，不抗凝，离心、分离血清、密封，保 存于．20℃冰箱，待测血清。另一管3ml，用2％肝素抗凝， 测定淋巴细胞核仁／核比值、T细胞亚群、NK细胞。 方法： T细胞亚群、NK细胞检测 中文摘要 采用SAP法检测试剂盒，用SAP法，按常规方法用淋 巴细胞分离液，分离出单个核细胞，制备细胞涂片，烤干备 用。制备显色剂备用。充分干燥的细胞涂片用记号笔在标本 酶标记链霉卵白素适量37℃孵育，PBS淋洗3次。滴加显色 剂，室温显色。可在显微镜下观察，待细胞膜上出现红色标 记物时，用PBS淋洗。滴加细胞核复染液，30秒后自来水 淋洗。滴加封片剂，盖片封片，镜检。高倍镜下选取染色好 的视野记数300个单个核细胞，细胞表面有红色标记物为阳 性细胞。算出阳性率。 核仁／核比值检测 取静脉血lml注入含有培养液的培养瓶中培养，然后倒 入塑料试管中离心。弃上清，加低渗液，混匀。放入37。C恒 温水浴箱中半小时。加固定液混匀。离心，弃上清，加5ml 固定液混匀，离心。弃上清，留取混悬液，滴于玻片上，自 然风干。玻片先加2滴A液，1滴B液，加盖玻片，放置于 烤箱，出现大量金黄色气泡为止。冲洗干净。 微量元素 采用原子吸收分光光度法。各种元素的空心阴极灯。用 单元素标准溶液配置不同浓度的标准液，绘制标准曲线。试 验用水为二次去离子重蒸水。血清标本采用常压湿法消化处 理后，上机常规操作得出数据。 统计分析 用SAS9．0统计学软件进行数据处理，各组数据均分段 中文摘要 赋值，并以自变量、应变量xy的形式输入。先采用单因素 logistic回归分析按a=0．1的入组条件将无意义的因素剔除。 剩余的因素做多因素logistic逐步回归分析。用T检验将各 组变量均值分别与正常对照均值比较。T细胞亚群与金属元 素之间先用正态性检验，符合正态者行两两直线相关分析， 异有显著性，P0．05为差异无显著性。 结果： 1所取60例胃癌患者中，存在复发转移者36例，占60％ (36／60)。 胃癌复发转移有关(PO．1)。此外性别、年龄、家族史、T细 属元素与胃癌复发转移的单因素logistic回归无统计学意义 (PO．1)。 P=0．007，OR=24．65)、Cu含量(，x=4．1 1) 两项因素与胃癌复发转移有关(PO．1)。 中文摘要 4胃癌患者核仁／核比值、CD3+、CD4+细胞阳性个数、 高于对照组(PO．01)。胃癌患者NK细胞阳性个数明显低于 对照组(PO．01)。 Mn存在负相关(PO．05)。 结论： 1胃癌有较高的复发转移率。 2单因素分析显示淋巴结转移、病理分期、病程长短、 复发转移的影响因素。淋巴结转移越广、临床病理TNM分 低，Cu、Mn、Cu／Zn越高，胃癌复发转移的危险性越大。多 因素分析显示病理分期，Cu含量越高，胃癌复发转移危险性 越大。这些危险因素可以作为临床预测胃癌复发转移有意义 的指标。 3胃癌患者的免疫功能明显低于正常范围。胃癌患者的 素高于正常对照，为临床上免疫学及元素治疗提供依据。 4某些金属元素的高低与免疫功能的高低存在相关性