光照因素封Rubisco酶在蛋白核内外分布的影响.pdfVIP

Ju1．2009，Volume3，No．7(SerialNo．20) JournalofLifeSciences，ISSN1934-7391，USA 光照因素封 Rubisco酶在蛋 白核内外分布的影警 蔡春萌，尹顺吉，汪 卿，柳俊秀，李春霞，何培民 (上海海洋大学水座舆生命学院，上海 201306) 摘 要：制借 了僚浒苔Rubisco酶及其抗髓，并虑用于研究光照因素封 Rubisco酶在蛋 白核 内外分布 的影窖。虑用生化技街分稚纯化了僚浒苔 Rubisco酶，并免疫注射入兔髓制借 了Rubisco抗髓，短鐾定 Rubisco大小亚基分子量分别约属50kD和 16kD，全酶的分子量在 500kD左右。虑用金檩免疫鼋镜分子 定位技街封 Rubisco酶集中蛋白核程度追行数值化分析。餮现在光强燮化畏期影窖贵验中，肯藻髓薅入较 高光强畸，Rubisco明颞由菜绿醴基赁向蛋白核中聚集，徙而更好地完成其光合作用功能。在完全黑暗虑 理和光合作用阻断剂DCMU虑理短期影窖中，并未锟察到PR．ratio的明颓降低，但PR．ratio在 24小峙中 的波勤被提前，造可能是由于正常生物筇律的破壤和藻额封不良缳境的反臆械制造成。此外，结果颞示僚 浒苔封光强的微小燮化并不敏感。 明键匍：光照；僚浒苔；Rubisco酶；蛋 白核 中Rubisco酶的分布追行敷值化分析，研究光照因 1．引 言 素燮化封 Rubisco酶在蛋白核内外分布的短期影譬 和畏期影警，探封在特定情况下 Rubisco在蛋白核 自徒上 70年代初 明蛋 白核主要 由Rubisco组 和菜绿髓基耍之同遥移的生物擘意羲。 成後，随後的免疫化罩技衍造一步 明莱绿髓中大 部分 Rubisco集中于蛋 白核中[1-4]，同畴蛋 白核 2．材料舆方法 Rubisco酶活性被榆测到，因而 餍蛋 白核可能涉 及光合功能以及CCM橙制L5曲】。 2．1材料、株系建立舆藻髓培善 封于Rubisco酶的生理挚研究 ，早期主要停留 保游苔属 2004年 1月采 自江赫如束海匾紫菜 在不同外界瑕境因素燮化造成的 Rubisco酶的酶 栽培架上，挑迭 30株菜片洗净後，缝遇一定特殊 量、活性及表连水平差异上。有静多研究曾揭示了 培善使其放散孢子并形成小苗，然後在颗微镜下分 光强封于 Rubisco活性和敷量的影馨。此外，CO2 罩倜小苗造行罩猬培蕃，并作扇株系连行保存， 漩度和Rubisco活化酶也是重要的影磐因素[7-81。近 30侗株系编虢依次徒YSJ．01到YSJ．30。 年柬，斡多研究阴始鹑向光照因 ¨j和斡多其它 将株系YSJ．01和YSJ一02遣行大量培蓄，培善 因素[3-4]封 Rubisco在蛋 白核内外分布的影磐上。 容器焉 1．3L三角瓶，培餐液禺VSE，盟度焉 l5％o， 遣些研究都属盎早揭示藻颊蛋 白核真正的功能意 培蓄僚件局：温度 15~2℃，光强20—30~tmolm．2s．1， 羲和作用檄制奠定了基磁。本研究虑用蛋白夤纯化 光照周期 l2L：12D，充氯培善。 技钭于獾得 Rubisco酶，并通遇免疫技钭于獾得 Rubisco 2．2Rubisco分雒舆纯化 酶抗髓，然後采用免疫金棵鼋镜技衍封僚游苔细胞 收集生畏旺盛的培餐藻髓，于 4℃加少量提取 。本研究受固家自然科学基金 (项目编虢 ，教育部博士黠基金 ，上海市教委重黠建彀学科 (项 目编琥：$30701) 资助，特此感谢 ! 【作者简介】蔡春前 (1980一)，男，助教 ；研究方向：海洋生物擎。 通瓤作者：何培民(1959一)，男，教授，博士生尊绵；研