毛细管电泳法评价细胞色素 c 与单链脱氧核糖核酸库的相互作用.pdfVIP

2012年12月 Vol.30 No.12 December2012 ChineseJournal of Chromatography 1229~1234 研究快报 DOI:10.3724/ SP.J.1123.2012.09033 毛细管电泳法评价细胞色素c与单链脱氧核糖核酸库的相互作用 1 1,2# 1∗ 梅　 芳 ,　 赵新颖 ,　 屈　 锋 (1. 北京理工大学生命学院,北京 100081;2. 北京市理化分析测试中心,北京 100089) 摘要:以细胞色素c(Cyt c)为碱性蛋白质模型,建立了毛细管电泳评价Cyt c与3种不同链长的单链脱氧核糖核酸 (ssDNA)库相互作用的评价方法,研究了离子强度对 Cyt c 与ssDNA 库相互作用的影响。 比较了Cyt c 与含有 20、40 和60个随机碱基序列的3种不同链长的ssDNA库的作用及基于未涂层毛细管和涂层毛细管的毛细管区带 电泳方法。 因碱性蛋白质在未涂层毛细管管壁上存在吸附,因此利用未涂层毛细管区带电泳不能区别3种ssDNA 库与其作用的差异。 利用涂层毛细管电泳法,在压力辅助的反向电压下,根据游离ssDNA库的峰面积变化可比较 3种ssDNA库与细胞色素c 的相互作用差异。 结果表明,含有20个随机寡核苷酸链长的ssDNA库与Cty c 的作 用最强。 此外,NaCl浓度显著影响Cyt c与ssDNA 库的作用。 在优化的实验条件下,0．02 mol/ L NaCl有利于两 60 者的相互作用。 调节盐浓度可抑制非特异性静电作用,能提高碱性蛋白质适配体的单轮筛选效率。 利用未涂层毛 细管电泳分析复合物及游离ssDNA库的峰面积变化,可优化有利复合物形成的盐浓度。 关键词:毛细管电泳;细胞色素c;单链DNA库;碱性蛋白质;核酸适配体 中图分类号:O658　 　 　 文献标识码:A　 　 　 文章编号:1000-8713(2012)12-1229-06 Comparison of interaction between cytochrome c and single strain deoxyribonucleic acid pools based on capillary electrophoresis 1 1,2 1∗ MEI Fang ,ZHAO Xinying ,QU Feng (1. School of LifeScience,Beijing Institute of Technology,Beijing 100081,China; 2. Beijing CentreforPhysical and ChemicalAnalysis,Beijing 100089,China) Abstract:An assessment method oftheinteractionbetween cytochrome c (Cyt c)selectedas a representative basicprotein andthreelengths of single strain deoxyribonucleic acid (ssDNA) pools was prese