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请在使用前仔细阅读说明书 ® 超氧化物歧化酶（SOD ）检测试剂盒- WST 操作说明书 100孔 *本试剂盒（货号：S311 ）只能用于检测SOD的活性，不能用于检测超氧阴离子（O2 - ） 本说明书提供了下列两种检测方法。 方法 1 （检测SOD 抑制率法）：100 孔可以检测 18-29 个样品。 方法 2 （检测SOD 活性法）： 100 孔可以检测 4-13 个样品。 两种方法的操作和实验结果准确度都有区别，请根据您的具体情况和实验准确度要求选择。如有疑问，请按照说明书下 方的联系方式咨询技术人员。 目录 一、检测机理 ‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥ 1 七、工作液的制备 ‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥ 2 二、试剂盒内容 ‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥ 1 八、操作步骤 ‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥ 2 三、贮藏条件 ‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥ 1  检测SOD抑制率法 ‥‥‥‥‥‥‥‥ 2 四、所需设备 ‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥ 1  检测SOD活性法 ‥‥‥‥‥‥‥‥‥ 3 五、注意事项 ‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥ 2 九、“1 Unit SOD”的定义‥‥‥‥‥‥‥ ‥‥ 4 六、样品制备 ‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥ 2 十、Mn-SOD活性的测定 ‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥ 4  红细胞或血浆 ‥‥‥‥‥‥ 2 十一、干扰物质 ‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥ 4  组织 ‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥ 2 十二、参考文献 ‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥ 4  细胞 ‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥ 2 检测机理 超氧化物歧化酶（SOD ）是一种重要的抗氧化酶，它可以催化超氧阴离子（O2 - ）的歧化反应，生成过氧化氢和单 质氧。目前有很多种直接或间接地测量SOD活性的方法，在这些方法中，使用硝基蓝四唑（氮蓝四唑nitroblue tetrazolium ， 简称NBT）的一种间接测量方法因其便捷、简单的使用方法而被广泛应用。但是，NBT法存在一些缺点，例如生成的染 料（Formanzan dye）的水溶性较低，会和黄嘌呤氧化酶的还原型发生反应等问题。SOD检测试剂盒- WST®提供了更为 ® 简便的检测SOD的方法，它是利用同仁化学研究所研发的高度水溶性四唑盐WST -1（2-(4-碘苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4- - ® 二磺酸苯基)-2氢-四唑盐,二钠盐），能与超氧阴离子（O2 ）反应生成一种水溶性的染料。WST -1被超氧阴离子还原的 比率与黄嘌呤氧化酶的活性线性相关，并且会被SOD所抑制（见下图，即红色区域SOD反应优先发生，SOD反应完后蓝 色区域WST-1反应才能发生）。因此，SOD或者SOD类似物的IC50 (50%的抑制浓度)就能用比色法来测定（同仁化学研 究所专利）。 WST® ：WST是日本同仁化学研究所的注册商标。 图1. SOD活性检测机理 试剂盒内容 - WST solution 1 ml×1瓶 - Enzyme solution 20 μl×1瓶 - Buffer solution 11 ml×2瓶 - Dilution buffer 10 ml×1瓶 贮藏条件 请在0-5℃下保存。试剂盒在0-5℃下可保存一年。在4 ℃下， WST®工作液可保存