蛇葡萄素对人胃癌细胞PI3k%2fAkt%2fP53信号传导通路作用机制.pdfVIP

目录 英文缩略词 错误!未定义书签。 中文摘要 错误!未定义书签。 英文摘要5 引 言7 正 文9 第 一 部 分 蛇葡萄素体外抗肿瘤活性的研究9 1 实验材料9 1.1 药材来源9 1.2 细胞株9 1.3 主要试剂9 1.4 主要试剂的配制 10 1.5 主要仪器设备 11 1.6 检测项目 12 2 实验方法 12 2.1 细胞复苏与培养 12 2.2 细胞冻存 12 2.3 蛇葡萄素对5 种人肿瘤细胞增殖的影响 12 2.4 统计学方法 16 3 结果 16 3.1 MTT 法 蛇葡萄素对5 种人肿瘤细胞增殖的影响 16 3.2 蛇葡萄素对5 种人肿瘤细胞形态学的改变 19 4 讨论 19 5 结论2 1 第 二 部 分 蛇葡萄素诱导人胃癌细胞凋亡的研究22 1 实验材料22 1.1 受试药物22 1.2 肿瘤细胞株22 1.3 试剂22 1.4 主要仪器设备23 1.5 检测项目24 2 实验方法24 2.1 流式细胞仪检测蛇葡萄素对SGC-7901 细胞凋亡的影响24 2.2 流式细胞仪检测蛇葡萄素对SGC-7901 细胞周期的影响24 2.3 统计学方法25 3 结果25 3.1 蛇葡萄素对SGC-7901 细胞凋亡的影响25 3.2 蛇葡萄素对SGC-7901 细胞周期的影响27 4 讨论28 5 结论31 第三部分 蛇葡萄素对人胃癌细胞PI3k/Akt/P53 信号传导通路的的调 控作用32 1 实验材料32 1.1 受试药物32 1.2 肿瘤细胞株32 1.3 试剂32 1.4 主要仪器设备33 1.5 检测项目34 2 实验方法34 2.1 肿瘤细胞培养34 2.2 试剂的制备34 2.3 引物设计以及合成35 2.4 提取总RNA 36 2.5 紫外分光光度法测量RNA 纯度37 2.6 逆转录聚合酶链式反应37 2.7 琼脂糖凝胶电泳39 2.8 PCR 产物分析39 2.9 统计学方法40 3 结果40 3.1 RT-PCR 产物的凝胶电泳结果40 3.2 RT-PCR 产物的光密度分析结果42 4 讨论43 5 结论49 结语与展望51 参考文献52 附 录54 综 述60 致 谢69 攻读学位期间发表的学术论文目录70 作者声明71 个人简历72 英 文 缩 略 词 英文缩写 英文全称 中文名称 A Absorbance 光吸收值 A260 Absorbance at 260nm 260nm 波长处吸光值 A280 Absorbance at 280nm 280nm 波长处吸光值 A375 A375 人黑色素瘤细胞 Annexin Annexin V-FITC Apoptosis Annexin V-FITC 细胞凋亡检测 V-FITC Detection Kit 试剂盒 DEPC Diethyl pyrocarbonate 焦碳酸二乙脂 DMSO Dimethyl Sulfoxide 二甲基亚砜 EB Ethidium bromide 溴乙锭 IC50 50%Inhibiting Concentration 半数抑制率 LOVO LOVO 人结肠癌细胞 MCF-7 MCF-7 人乳腺癌细胞 MTT Methyl Thiazolyl Tetrazolium 四甲基噻唑兰 mRNA Message