13-肿瘤与遗传.ppt

一、细胞融合实验 Harris（1971） 应用微细胞技术 将含有一条正常Chr的微细胞与肿瘤细胞融合，可抑制肿瘤，这为寻找TSG提供线索。 二、克隆第一个TSG –RB1 细胞遗传学证据： 1976年 对多个RB 患者Chr缺失鉴定，最后确定于13q14 RB1基因 分子遗传学证据： 1983年 Cavanee用13q12-q14片段为探针， 经杂交实验确证存在此区域存在一个4.7kb的 基因 1986年 Friend 首先分离一cDNA 克隆。 Lee WH又克隆了三个重叠的cDNA克 隆，进行 RB基因测序。 1988年 Su Huang HJ用反转录酶为载体将 RB导入RB细胞系，基因表达并抑制 肿瘤特征，证实RB1是一个TSG。 RB1： 200kb长，27exons mRNA 4.7kb，编码105kd蛋白，928个氨基酸, 是一与DNA结合的磷酸化蛋白质， 具有-GGAAGTA元件，受p53调节。 * RB基因— 第一个被克隆的TSG 三、杂合性丢失（Loss of heterozygosity-LOH） 肿瘤细胞染色体特定区域的杂合性等位基因中的一个丢失，这种现象称杂合性丢失。 在肿瘤抑癌基因中