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第34卷 第3期 陕西师范大学学报 (自然科学版) Vo1．34 NO．3
2006年 9月 JournalofShaanxiNormalUniversity(NaturalScienceEdition) Sep。2006
文章编号：1672—4291(2006)03—0087—05
应用 RAPD技术构建绞股蓝 DNA指纹图谱
庞 敏， 邹芳平， 肖娅萍
(陕西师范大学 生命科学学院，陕西 西安710062)
摘 要 ：以不 同类型绞股蓝 (GynosternrnaPentaphyllum，(Thunb)Makino)DNA为模板 ，进行
RAPD反应条件的优化及RAPD结果分析 ．最终筛选的 D反应条件为：2O LPCR反应体系中
包括了10Xbuffer2．0tLL，Mg22．0mmol／L， TPO．2mmol／L，引物O．5mmol／L，Taq酶 1u，
模板 DNA50ng．反应程序为 94℃3min一 (94℃30s一38℃40s一72℃1min)45个循环一72℃10
mi 4℃保持，并从66条随机引物中筛选出5条带型丰富、适合于绞股蓝分析的随机引物．以这 5
条随机引物对不同类型绞股蓝进行RAPD扩增，识别其特征性多态位点，建立分子标记检索表．
关键词 ：绞股蓝 ；RAPD；DNA指纹图谱
中图分类号：Q949．782 文献标识码：A
Construction OfDNA fingerprintfor
GynostemmaPentaphyllum (a~unb)MakinobasedonRAPDanalysis
PANG Min，ZOU Fang-ping，XIA0 Ya-ping
(CollegeofLifeScience，ShaanxiNormalUniversity，Xian710062，Shaanxi，China)
Abstract：TheoptimizedRAPD analysiswithdifferentG抑 ￡溯 撇 Pentaphyllum aStemplatesin
PCRampliticationWaSreportedinthispaper．Theoptionalparametersfor20t*LPCRreactionsystem
are10×buffer2．0tLL，Mg 2mmol／L，dNTP0．2mmol／L，randomprimer0．5mmol／L，Taq
DNApolymerase1U，andtemplateDNA50ng，respectively．Theoptimiezdprotocolfortheraectionis
94℃(3min)—94℃ (30s)—38℃ (40s)—72℃ (1min)45cycles72℃ (10rain)—4℃ (constant
temperature)．The5primerswereselectedfrom66randomonestocarryoutthisRAPDamplification
SOthatthechraacteristicpolymorphoussitesofGynostemmaPentaphyllum raelocatedaswellasthe
identifiactionkeybasedonmoleculra mrakersisestablished．
Keywords： os￡em仇口Pentaphyllum (Thunb)Makino； D；DNAfingerprint
绞股蓝 ( y，z￡聊z Pentaphyllum ，(Thunb) 在长期的自然环境及人工栽培的条件下，逐渐形成
Makino)系葫芦科多年生攀缘草质藤本植物，全草 了众多品种及栽培类型．目前，对绞股蓝的研究主要
入药．绞股蓝含80余种皂苷，其
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