香烟烟雾水溶物诱发蚕豆根尖细胞微核的研究TheStudyontheMigronucleusinRoot-tipCellsof.pdfVIP

遗传 HEREDITAS(Beijing)17(3):35-381995 香烟烟雾水溶物诱发蚕豆根尖细胞微核的研究 秸 庆① 朱卫中 潘真强② 张玉忠② 柴 军② 朱 俊 屈 艾 江（苏省徐州师范学院生物系，徐州 221009) 摘 要 本文研究了不同浓度的香烟烟雾水溶物对蚕豆根尖细胞微核的诱变作用，结果表明，上述水溶物 能够引起蚕豆根尖细胞微核率发生敏感性变化，提示蚕豆根尖细胞微核技术可作为一种香烟遗传毒理学 检垛方法使用．此外，还对使用该方法的意义以及添加V：对香烟烟雾水溶物微核率的影响进行了讨论． 关健词 香烟烟雾水溶物，微核率，蚕豆 TheStudyontheMigronucleusinRoot-tipCellsofViciafaba InducedbyWater-solubleSubstancesContainedinCigaretteSmoke JiQing(3) ZhuWeizhong PanZhenqiang ZhangYuzhong ChaiJun ZhuJun QuAi (DepartmentofBiology,XuzhouTeachersCollege,Xuzhou,Jiangsu221009) 香烟烟雾中含有多种化学致癌物和致癌物前体物质U()。吸烟增加患肺癌的风险已在流行病学、细胞遗传学 和分子遗传学等各方面得到广泛证实(5（,’，”〕．自从致癌性与致突变性之间的密切关系得到证实以来 (S（,’。〕，许 多学者用Ames试验来研究香烟烟雾的致癌作用．近年来又有学者用染色体畸变和姐妹染色单体交换技术研究香 烟的致突变作用(2,’〕，或使用小鼠外周血淋巴细胞微核技术研究香烟凝结物的致突变作用，但后者没有得到阳 性结果2)（． 蚕豆根尖细胞微核技术是进行遗传毒理学研究的有效手段，近年来这一技术在遗传毒理学领域和环境污染监 测方面应用较多，本实验研究了香烟烟雾水溶物对蚕豆根尖细胞微核率影响，并在此基础上探讨了应用这 一技术 监测香烟遗传毒理学指标的可行性，以便能为烟毒检测提供一种简便可靠的实验方法． I材 料 和 方 法 1.1材 料 1.1.1香烟 红杉树牌甲级过滤嘴香烟 购（自徐州市市场），每支香烟平均含烟丝855.8112.6毫克． 1.1.2蚕豆 华中师范大学生物系培值的敏感蚕豆品种— 松滋青皮豆 购（自华中师范大学生物系）． 1.2方 法 1.2.1香烟烟雾水溶物的制备 把香烟的滤嘴端插人单向气吹的进气端，用软导管把出气端与另一个扎有细密 小孔的出气嘴相连。出气嘴浸入盛有500m1蒸馏水的烧杯中．点燃香烟，缓慢抽吸，使烟雾以小泡状缓缓通过 ①现工作单位：南京师范大学生物系，南京 210097, ②我系九三届毕业生． 03PresesAddress:DepartmentofBiology,NanjingNormalUniversity,210097. 36 遗 传 HEREDITAS(Beijing)1995 17卷 蒸馏水，直至香烟燃毕为止． 1.2.2蚕豆根尖制备 蚕豆种子用蒸馏水在28℃下浸种24小时后置于铺有温纱布的托盘内，在28℃下培养2 -3天，待根长到 1.5-2.5厘米时备用． 1.2.3实验分组与处理 分别取香烟 1/4支、1/2支、I支、2支、4支、8支共6组制备香烟烟雾水溶物， 以蒸馏水为空白对照 C（K,)．另取适量维生素E配成终浓度为2.933mg/ml的V：乳浊液 用（少量乳化剂OP 乳化），分为两组，一组作为加有V：的对照组 C（KZ),另一组使用2支香烟制成烟雾水溶物备用． 选取发育良好，根长一致的幼苗，插人有孔的培养板中，将培养板置于上述各组烧杯上，使根尖完全浸入溶 液中，在28℃下培养8小时后用蒸馏水清洗根尖两次，再换人新鲜蒸馏水进行修复培养22小时以后剪下根尖， 以卡诺氏固定液 （甲醇 ：冰乙酸二3：1)固定后再用imol/LHCl在70℃下水解 15分钟，其后经Schiff试剂 染色，常规压片镜检等步骤统计蚕豆根尖细胞微核率 (Micronucleusfrequencies,MCNF).以每 1000个细胞中 所含微