四物汤配方颗粒对骨髓抑制小鼠造血损伤恢复作用的实验研究.pdfVIP

四物汤配方颗粒对骨髓抑制小鼠造血损伤恢复作用 的实验研究 1 1 2 1 1 1 陈志伟 ，祝彼得 ，许惠玉，刘曾敏 ，陈杏花，秦建 1 成都中医药大学，成都（610075 ） 2 北京中医药大学，北京（100029 ） E-mail ：czwzp@ 摘 要：目的：观察四物汤配方颗粒对骨髓抑制小鼠造血功能的影响。方法：采用CO60γ照 射和注射环磷酰胺复合制备骨髓抑制小鼠模型。应用实验血液学、造血祖细胞培养等技术方 法探讨四物汤配方颗粒对骨髓抑制小鼠外周血、骨髓有核细胞数、骨髓造血祖细胞的增殖的 影响。 结果：四物汤配方颗粒能促进外周血、骨髓有核细胞数、骨髓造血祖细胞的增殖。 结论：四物汤配方颗粒能促进骨髓造血功能的恢复。 关键词：四物汤配方颗粒，骨髓抑制 近年来，国内、外的学者对四物汤的药理作用主要集中在免疫、血液、心血管、抗放射 和抗化学药物的毒性等方面，在中药复方现代化方面亦作了初步的探索[1] 。四物汤配方颗粒 是以中药古方“ 四物汤”作为其剂型基础的现代中药，采用现代工艺技术而制成。本课题拟研 究颗粒对骨髓抑制小鼠造血功能的影响，为中药的剂型改良应用提供有价值实验依据。 1. 材料与方法 1.1 实验动物 BALB/c 纯系雄性小鼠50 只，8～12 周龄，体质量18～22g,成都中医药大学实验动物中 心。动物在实验前适应环境3 天后进行实验。 1.2 药物：四物汤配方颗粒由四川绿色药业科技发展股份有限公司生产，由我校药学院傅 超美老师馈赠。 1.3 主要试剂 环磷酰胺：上海华联制药有限公司产品，批号：041007；重组人促红细胞生成素（rhEPO ）： 成都地奥九泓制药厂，批号；重组小鼠白细胞介素-3 （rmIL-3 ）：PeproTech 公 司，美国，批号：030248；重组小鼠粒单系集落刺激因子（rmGM-CSF ）：PeproTech 公司， 美国，批号：030555，重组小鼠促血小板生成素（rmTPO ）：PeproTech 公司，美国，批号： 0702262 ；重组人粒细胞集落刺激因子（rhG-CSF ）：长春金赛药业有限责任公司产品，批号： 。 1.4 主要设备 超净工作台：JJT-900/1300 型，北京半导体设备厂；倒置相差显微镜：CX-1O型，日本 Olympus公司；全自动血球分析仪：HS-18 型，意大利；Co60γ源：由四川省农业科学院生物 技术核技术研究所 1.5 骨髓抑制小鼠模型的制备 小鼠经 2.0Gy 60Coγ全身照射后的第4天开始腹腔注射环磷酰胺(Cy)40mg/kg （临用前配 [2-3] 制）、每天注射一次，连续注射3天完成模型制备 。 -1- 1.6 动物分组与给药 将小鼠随机分为正常对照组、模型组、四物汤配方颗粒组、阳性对照组，每组10只。除 正常对照组外，其它4组均进行造模。小鼠造模完成后24h开始给药，四物汤配方颗粒按中药 药理学研究方法[4]计算小鼠的等效剂量为5g/kg.d，灌胃0.2ml，阳性对照组腹腔注射rhG-CSF 125µg/kg，每只小鼠腹腔注射0.2ml 。连续给药7天。 1.7 外周血细胞计数 在给药8 天后24h, 经小鼠眼球后静脉丛采血20µl,稀释后用HS-18 型全自动血细胞分析 仪进行血常规检测。 1.8 骨髓有核细胞悬液的制备 在给药8天后24h,颈椎脱臼处死各组小鼠，取出股骨,用6号针头以1ml生理盐水液冲出骨 髓细胞, 4号针头过滤制成单个骨髓细胞悬液。取部分骨