干细胞移植治疗神经变性疾病.docVIP

干细胞移植治疗神经变性疾病神经变性疾病为一类缓慢起病、病程呈进行性发展、预后不良的疾病，迄今尚缺乏有效的根治方法。临床常见的神经变性疾病有帕金森病（Parkinson’s disease，PD）、肌萎缩侧索硬化（myotrophic lateral sclerosis，ALS）、亨廷顿舞蹈病（Huntington’s disease，HD）和阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）等。这些疾病虽病因各异但在病理上均有中枢神经不同部位及不同程度的神经元脱失和功能异常。替代丢失的神经元，使之功能恢复，是治疗这类疾病的新思路。干细胞是一类未分化的多潜能细胞，例如，造血干细胞（hematopoietic stem cel）、间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSCｓ）等在一定的体外条件下可以向成熟神经细胞分化。体内实验也证实神经干细胞或非神经组织来源的干细胞移植入受损的脑组织内可以分化为成熟的神经细胞，新生的神经细胞能替代脱失的细胞发挥功能，为这类神经系统难治性疾病提供了新的治疗方法。 干细胞移植治疗帕金森病 McKay等[]体外扩增小鼠的胚胎干细胞，从中分离出神经干细胞，在加有bFGF（牛碱性成纤维细胞生长因子）的培养基中扩增，去除分裂素后这些神经干细胞大量分化为能神经元。Sasai等[]发现将小鼠的胚胎干细胞与骨髓来源的间充质细胞共培养可以促进干细胞的分化，培养后出现大量TH）阳性神经元这些神经元产生，移植入小鼠纹状体后可以存活达2周。但这些体外培养的分化前体状态的能神经元移植后存活时间短，并且这些移植后的细胞是否完全具备成熟中脑能神经元的功能仍不明。Ende 等[]比较了骨髓来源的干细胞与人脐血干细胞在PD小鼠中的作用。他们将PD转基因的B6CBACa-AW-J/A-Kcnj6小鼠分5.6 x 106同基因骨髓单核细胞和静脉注射100-110 x 106的人脐血单核细胞治疗，并且不使用免疫抑制剂。当对照组有50%的小鼠死亡时，骨髓细胞移植组有1只死亡，脐血单个核细胞治疗组有2只死亡。治疗后200天时，对照组小鼠仅有1只存活，骨髓单核细胞治疗组有2只存活（p0.05），而脐血单核细胞治疗组却有4只存活（p0.001）。研究显示人脐血单核细胞显著延缓小鼠出现临床症状的时间，并且延长小鼠存活时间，作用较同基因骨髓细胞显著。 近年来随着基因工程技术的发展，已有人尝试将转基因技术与干细胞移植相结合治疗PD。Park等[]将胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)的基因转入到雄性鼠的然后将此细胞移植到健康的雌性鼠体内，8周后建立1-甲基-4-苯基1，2，3，6 四氢吡啶(MPTP)PD模型，观察转入GDNF基因后的对黑质细胞的保护作用，结果发现TH免疫阳性的黑质神经元明显多于对照组，显示转基因后对黑质神经元有保护作用。 干细胞移植治疗肌萎缩侧索硬化 ALS病变侵犯脊髓侧索和皮质的运动神经元，导致进行性的运动功能丧失。ALS的病因不明，少数病例有家族史，与100个已知的铜/锌可溶性超氧化物歧化酶（Cu/Zn SOD1）基因突变有关。基因突变导致蛋白质异常折叠，对某些易感神经元（如脊髓的胆碱能运动神经元）产生毒性。目前针对ALS的治疗包括神经营养因子及促进异常蛋白清除的因子等，但这些治疗在动物实验中都未能奏效。而干细胞移植能替代病变部位的胆碱能运动神经元，或者使胆碱能运动神经元再生，为ALS的治疗提供了可能性。从胚胎神经干细胞分化为胆碱能运动神经元已获成功[]。核转录因子活化某些基因序列是使干细胞转化为运动神经元的关键其中Hb9对最终分化为胆碱能运动神经元至关重要。在大鼠，Hb9的表达可以使原始的、nestin反应阳性的胚胎神经干细胞发育成胆碱能神经元[]，这些细胞替代缺失的运动神经元，并通过脊髓前角与相应的肌肉建立再联系。Garbuzova-Davis 等[]将人脐血单核细胞经静脉移植入ALS模型G93A小鼠体内，结果发现移植后至少使小鼠的病程延缓了23周。移植细胞进入脑和脊髓内运动神经元变性的区域，并且存活达10～12周。这些细胞迁移至脑和脊髓实质，表达神经干细胞、神经元和神经胶质细胞的标志蛋白nestin、Ⅲ-β tubulin）和GFAP。至于脐血细胞移植后的作用机制，可能不单纯是移植细胞对损伤神经细胞的替代作用，因为表达神经细胞抗原的细胞数量很少，而更可能的机制是通过对自身免疫过程的调节而产生的神经保护作用。Ende等[]观察了大剂量的脐血单核细胞对SOD1基因突变小鼠（一种ALS小鼠模型）的作用。小鼠在4～5个月时出现瘫痪，平均存活期为130天。在所观察的23只小鼠中，2只在出现瘫痪前死亡。剩余小鼠分别于静脉给予5×106的同基因骨髓单核细胞和34.2-35.6×106的脐血单核细胞。