头孢喹诺注射剂在鸡体内药代动力.docVIP

头孢喹诺混悬剂在鸡体内药代动力学生物等效性试验报告 1.2 主要溶液配制 1.2.1 标准液（μg·mL-1） 1.2.2标准添加溶液（μg·mL-1）从冰箱中取出标准储备液（μg·mL-1）回至室温，μg·mL-1、0.25 μg·mL-1、0.5 μg·mL-1、1.0 μg·mL-1、2.5μg·mL-1、5 μg·mL-1标准工作溶液。 1.2.4 HPLC流动相 1.3 主要仪器设备 调速多用振荡器HY-4型，同华电器有限公司离心机LD4-2A，北京医用离心机厂涡混合仪WH-1型，上海沪西分析仪器厂laborota 4003型，德国Heidolph公司。 1.4 试验动物 鸡20只，公母各半，～月龄，体重2.2～2.5kg，喂以不含药物的全价饲料。预饲1周，给药前禁食12 h，自由饮水，给药后4 h，让其自由采食。 2 试验方法 2. 色谱条件μL；色谱柱（5 μm，4.6 mm×50 mm i.d.）；流速mL·min-1，等度洗脱，运行时间为15min。 2.3 标准曲线绘制μg·mL-1、0.25 μg·mL-1、0.5 μg·mL-1、1.0 μg·mL-1、2.5μg·mL-1、5 μg·mL-1标准工作溶液μL进HPLC分析。以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线。2.4 给药 2.采集 15min、30min、1h、2h、3h、4h、6h、8h、12h、24h、48h、72h、96h、120h和144h心脏采血10 mL，加入含有抗凝剂肝素钠的试管中，室温下静置2 h，2500 rpm离心，取上层血浆，-70℃保存。 2.6样品前处理 μm有机滤膜后取100 μL进HPLC测定。 2.7 定量限和检测限的测定 取个空白，按上述样品前处理的方法处理，测得基线噪音值按信噪比S/N=为检测限（LOD），S/N=为定量限（LOQ）。 2. 添加回收率和精密度 分别取空白，添加一定体积的标准添加溶液，使中药物浓度为μg·mL-1、0.5 μg·mL-1、μg·mL-1，按上述样品前处理方法分别处理后HPLC测定，一日内每个浓度取个平行样品，分别测定，计算回收率和日内变异系数。 3 试验结果 3. 标准曲线μg·mL-1范围内色谱峰面积与浓度呈线性相关。其线性方程为：Y=2500X-1000，R=0.9999。若分析样品时，浓度超出此范围，则稀释溶液上机即可。 3.2 计算 中的浓度可用公式（-1）来计算： 样品浓度（μg·-1）= （-1） S：的峰面积B：标准曲线的截距K：标准曲线的斜率V：提取样品最终定容的体积（mL）M：样品的量（）F：稀释因子，F= 3..2 添加回收率的计算 添加样品的回收率用公式（-2）计算 回收率（%）= （-2）3.3 定量限和检测限 根据个空白样品的基线噪音值求其平均值，按信噪S/N=为LOD），S/N=为LOQ），求得中的LO和LO0.01 μg·mL-1和0.025 μg·mL-1。 A. 标准溶液色谱图μg·mL-1）；B. 空样品色谱图；C. 添加样品色谱图μg·mL-1） 图-1 头孢喹诺的高效液相色谱图3.4 添加回收率 色谱图-1，由图可见，样品中杂质分离良好，无明显干扰峰。中在μg·mL-1添加水平，平均回收率%-92.8%，变异系数%-6.8%，回收率结果见表1-1。 表1-1 鸡血浆添加头孢喹诺回收率测定（n=5） 添加浓度（μg·mL-1） 平均回收率（%） 变异系数（%） 0.025 77.1±6.9 6.8 0.5 85.7±6.1 5.7 5 92.8±5.5 6.6 3.5 药-时数据 鸡给药后在不同时间点采血测得的药物浓度见表1-2和1-3 3.6 药代动力学参数 图1-2 鸡肌肉注射2 mg?kg-1头孢喹诺的血药浓度-时间曲线图 表1-2 鸡肌肉注射5 mg?kg-1头孢喹诺血药浓度-时间数据（μg·ml-1）（第一周期） 鸡号 停 药 时 间(h) 0.25 0.5 1 2 3 4 6 8 12 24 48 72 96 120 111144 海正 1 1.1483 2.2668 2.9350 2.3231 1.1490 0.5960 0.1261 0.0387 ND ND ND ND ND ND ND 2 3.3077 4.4280 3.9288 2.2459 1.1797 0.6156 0.1613 0.0692 0.0099 ND ND ND ND ND ND 3 0.8848 2.3648 2.6940 2.1251 2.3766 1.4188 0.4456 0.1223 ND ND ND ND ND ND ND 4 0.9423 1.9689