2011.微生物实验报告doc.docVIP

实验一、光学显微镜的使用及微生物的观察 酵母菌美蓝浸片的观察---- 或---- 标本图片 结果：(1)绘图说明你所观察到的酵母菌的形态特征。 讲解：显微镜的使用。美蓝浸片的制片与观察 实验二、微生物个数的计数法 讲解：酵母菌悬液方法， 血球计数板的使用与清洗，显微镜计数方法、 实验报告：（取液5个中方格共有80小方格）。 计数室 各中方格中微生物数目 微生物个数/ml 二室平均值 1 2 3 4 5 第一室 第二室 实验三、细菌的革兰氏染色 标本：大肠杆菌 涂片→干燥→固定→染色（初染→媒染→脱色→复染）→镜检 问题：哪些环节会影响革兰色染色结果的正确性？ 其中最关键的环节是什么？ 实验一 普通光学显微镜的使用及微生物形态观察 一.目的 1.掌握光学显微镜的结构、原理，学习显微镜的操作方法和保养。 2.观察集中微生物的个体形态，掌握生物图的绘制方法 二.显微镜的结构、光学原理及其操作方法 （一）结构 1.机械部分 1）镜筒? 显微镜上部圆形中空的长筒，筒口上端安装两个相同放大倍数的目镜，下端与物镜转换器相连，作用是保护成像的光路与亮度。由于观察者的瞳距有所不同，双筒显微镜多配有瞳距调整装置。 2）转换器　固定在镜筒下端，分两层，上层固定不动，下层可自由转动。转换器上有2～4个圆孔，用来安装不同放大倍数的物镜。 3）物镜 安装在转换器下半部分的透镜，多为放大倍数不同的四个。可通过旋转转换器改变观察用物镜。 4）粗准焦螺旋　在镜臂的下部，直径较大。通过转动粗准焦螺旋，使载物台上下移动，从而粗略的调节像距。 5）细准焦螺旋　在镜臂的下部，一般与粗准焦螺旋同心安装，直径较小。它调整像距的范围较粗准焦螺旋小，可以精细调整像距。 6）镜座　显微镜的底部、镜臂下方呈马蹄形的金属座，用以稳固和支持镜身。 7）镜柱　从镜座向上直立的短柱。上连镜臂，下连镜座，可以支持镜臂和载物台。 8）载物台　从镜臂向前方伸出的金属平台。呈方形或圆形，是放置载玻片或标本的地方。中央有通光孔，通光孔左右各有一个弹性的金属压片夹，用来固定载玻片。 9）推进器 较高级的显微镜，在载物台上常具有推进器，它包括夹片夹和推进螺旋，除夹住切片外，还可使切片在载物台上左右方向和上下方向移动。 2.光学系统 1）目镜 又叫接目镜。它是安装在镜筒上端的凸透镜镜头。每台显微镜的目镜都配有一套，一般包括例如 5×、10×、15×、20×。镜筒上只能安装一个目镜，通常选择10×。 2）物镜　是决定显微镜质量的关键部件。安装在转换器的孔上，也是由一组透镜组成的，能够把物体清晰地放大。一般转换器上同时安装三个或4个放大倍数不同的物镜，即：低倍物镜（4×、8×或10×）、高倍物镜（40×或45×）和油浸物镜（90×或100×），根据需要选择使用。 3）光源 双目显微镜采用电灯作为光源，并可调整光源亮度。在不使用显微镜作观察时，应尽量关闭光源，以延长灯泡使用寿命。 对于单目显微镜，光源由反光镜承担，它是安装在聚光器下面的一个可作各种方向的翻转的一面平另一面凹的双面圆镜，反射光线以供观察。光线较强时使用平面镜，反之使用凹面镜。 4）聚光器　聚光器是安装在载物台下面的一个凸透镜，可集中光源投射来的光线。在载物台下方有一个聚光器调节螺旋，它可以使聚光器升降，用以调节光线的强弱，下降时亮度降低，上升时亮度加强。 5）虹彩光圈　又称可变光阑，由多数金属片组成。使用时移动其把柄，可控制聚光器透镜的通光范围，用以调节光的强度。虹彩光圈下常附有金属圈，其上装有滤光片，可调节光源的色调。 6）遮光器　有些简单的显微镜无聚光器和虹彩光圈，而是装有遮光器。遮光器呈圆盘状，上面有大小不等的圆孔（光圈）。光圈对准通光孔，可以调节光线的强弱。 显微镜放大倍数 = 目镜放大倍数 × 物镜放大倍数（二）实验原理 成像原理 光路：光源→虹彩光圈→聚光镜→通光孔→标本（一定要透明）→物镜→镜筒→目镜→眼。 由透镜成像规律可知，对于凸透镜，当2fu.f，成倒立、放大的实像；当uf，成正立、放大的虚像。对于物镜成像系统，观察对象距离镜头的距离（称为工作距离）即物象u，满足2fu.f，故成倒立放大的实像；对于目镜成像系统，由物镜形成的倒立放大的实像成为被观察物，它到目镜的距离即物象u，满足uf，故成放大的正立的虚像。因此，最终成像于标本而言，是放大的、倒立的虚像；放大倍数为目镜放大倍数与物镜放大倍数之积；决定显微镜放大能力和成像清晰度的关键部件是物镜而不是目镜。 三、仪器和材料 1.显微镜 2.黑根霉装片、曲霉示菌丝和孢子装片、匍枝根霉装片、面包霉示菌丝和孢子装片、螺旋藻装片、微囊藻装片、念珠藻装片、鱼腥草藻装片、颤藻装片、丝藻装片、伞菌切片、枯草芽孢杆菌装