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双斑蟋腹末神经节的投射研究 摘要：双斑蟋尾须上存在又多种感受器，到现在为止的研究已经表明这些感受器具有感受识别气味、维持机体平衡、辨别方向等功能。但感受器传入纤维的中枢投射部位及形态尚未清楚。本论文通过神经解剖学的研究方，法运用氯化镍逆行染色和银增感的神经细胞标记技术，对尾须感器在腹末神经节内的投射纤维投射分布及形态进行了研究。研究结果表明：投射纤维大部分分布在腹末神经节的侧端，纤维没有越过神经节中线部分，少量神经纤维投射到中线处，有两条染色比较深得纤维通路，有少量神经元分布在腹末神经节的中下段，在其中线处只看到一个神经元胞体。在腹末神经节底侧端有少神经元出现，背侧其中有一条纤维分支。综上所诉，尾须感器投射到腹末神经节的纤维多投射到腹侧，少量投射到背侧。 关键词：双斑蟋尾须腹末神经节 1、引言 1.1神经投射的研究历史和现状 近年来对昆虫神经系统的研究发展较快，国内外学者应用许多染色方法对昆虫进行形态组织学的观察。一般应用的材料有2种——荧光着色剂、金属盐和酶。我国常用的染色方法为nissl染色和苏木精-伊红染色法简称he染色法。前者是用碱性染料对神经组织进行染色的一种方法。神经元胞浆含有核糖核酸，并以nissl小体形式存在；细胞核则不同，其中染色质较少，故染色浅。本研究继续研究尾须感受器传入神经纤维腹末神经节的投射并可以清晰的观察出其轴突走向。 2、材料和方法 尾须神经节投射的组织学研究应用氯化镍逆行染色和银增感染色法。 （1）氯化镍逆行染色 为了研究双斑蟋尾须脑神经元的分布及形态，对其腹末神经节进行氯化镍逆行染色。具体方法如下：解剖双斑蟋，将蟋蟀肢翅剪断，用剪刀将背部剪开，露出腹末神经后，将要染色的神经束剪断。神经束的切断，使用特别的小剪刀，小心剪断。要使被染色的神经数减少，在神经束的基部用玻璃微电极的尖端多次刺入，使通过神经束的部分神经轴突切断。把细塑料小管尖端熔化弄弯并用刀片削成斜坡状，保证小管中空，用1 ml注射器将管内注满氯化镍染色液。使装满氯化镍的塑料小管尖端与虫体保持一定的距离，将一端剥离的神经索末梢用玻璃钩搭在塑料小管的尖端有染液的部分，用锡纸包裹剩余神经索及脑神经节，以便减少神经节水分的蒸发和防止染液污染神经节表面，影响对神经元的观察；塑料管的另一端用橡皮泥固定于蜡盘的边缘，使其固定不动。为了防止神经节干燥，将制作完的标本放在大塑料盒内，在塑料盒内装少量水，并用大烧杯罩住以便减少蒸发。在室温下将上述实验完后的解剖皿放入底部放生湿纸的大盘上，再盖上盖，放入冰箱中（4℃），放置一个晚上后，或在室温约15℃条件下放置3-8小时后将标本取出，需要进行染色、固定、脱水、透明取出离子液管，将断端附近用昆虫生理盐水冲洗。 管中的液体用口吹气使之排出，残余液体用水洗净，待下次使用。将多余的神经束切掉，将神经节分离取出，移到放有昆虫生理盐水的瓶内。实体显微镜下，滴入数滴氯化钴溶液。边晃动液体边在显微镜下观察。直到发色适合为止，大约10-15分钟。随后用系列酒精（70%，80%，90%，100%）脱水分别10分钟。然后放入水杨酸甲酯中透明，透明后将标本放置于显微镜下，对其神经节内部神经的分布及走行情况进行观察及绘图。 2.1课题探究的意义 本实验通过从外部形态、扫描电镜的超显微结构观察和行为学实验以及神经逆行染色等多种实验技术对双斑蟋的尾须感器系统进行比较系统和深入的探究，并结合近年来对双斑蟋触角等其他器官感受器的研究成果，更全面的揭示双斑蟋感受器结构特点。 3、结论 尾须感器在腹末神经节的投射纤维大部分分布在腹末神经节的底侧端，纤维没有越过神经节中线部分，少量神经纤维投射到中线处，有两条染色比较深得纤维通路，有少量神经元分布在腹末神经节的中下段，在其中线处只看到一个神经元胞体。在腹末神经节底侧端有少神经元出现，背侧其中有一条纤维分支。综上所诉，尾须感器投射到腹末神经节的纤维多投射到腹侧，少量投射到背侧。