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栀子中京尼平苷的微生物转化研究_药学论文 栀子中京尼平苷的微生物转化研究_药学论文 作者：王永宏，苏建，王建芳，廖勇，冯杉，孙启玲 【摘要】 　　目的通过筛选一株高产β葡萄糖苷酶菌株对栀子进行发酵，使得其中的京尼平苷转化为京尼平。方法通过底物特异显色筛选模型筛选菌株，并使用正交实验对发酵条件进行优化。结果筛选到一株产β葡萄糖苷酶酶活可达到8.2 u/ml的青霉Penicillium nigricans，并优化了发酵转化条件，使得京尼平苷的转化率可达到95%以上。利用波谱法对发酵产物进行了结构鉴定，证明转化产物为京尼平。结论 通过微生物转化的方法可以使栀子中主要成分京尼平苷转化成具直接作用的有效成分京尼平。 【关键词】 栀子 京尼平苷 青霉 京尼平 微生物转化 　　Abstract:ObjectiveGardenia (Gardenia jasminoides Ellis) was subjected to fermentation process by βglucosidase strain to transform geniposide into genipin, a more effective compound. MethodsThe model of specific colorizing was used to screen the strain. The conditions of fermentation process were optimized by an orthogonal layout. ResultsThrough the model of specific colorizing, the strain with high ability of microbial transformation has been screened. The transformation rate could reach to 95%. It was proved that the products was genipin.ConclusionGeniposide which was the effective compound of gardenia can be transformed into genipin by the method of microbial transformation. 　　Key words:Gardenia jasminoides; Geniposide; Penicillium nigricans； Genipin; Microbial transformation 　　栀子是茜草科（Rubiaceae）栀子属（Gardenia）植物，入药部分为其干燥成熟果实，性味苦寒，归心、肺、三焦经。主要具有保肝利胆之功效，药效成分是以京尼平苷为代表的环烯醚萜苷类，此外还含有有机酸类、色素类、挥发油等成分［1］。 　　药代动力学研究发现，栀子有效成分京尼平苷的利胆作用是通过肠道微生物产生的β葡萄糖苷酶水解所生成的京尼平而引起的［1］。日本Mie Inao等对栀子治疗肝硬化的研究表明，京尼平苷的水解产物京尼平能够抑制肝脏星状细胞的活性而达到对肝硬化疾病的治疗［2］。同时，已有研究证明京尼平亦具有显著抗炎、抗脂质过氧化、抗血管生成、抗NO生成［3］、抗淀粉β蛋白质的神经毒性等药效［4］， 京尼平也是迄今为止所研究的环烯醚萜物质中抑制诱变剂诱变活性最强的物质［1］。京尼平还可被应用于生物材料的交联，它不仅能形成稳定的交联制品，同时具有细胞毒性小，生物相容性好，抗降解能力强和应用领域广泛等优点，是非常有前途的生物交联剂。京尼平在栀子中的含量很低，约为0.005%～0.01%，主要是以其前体形式京尼平苷形式存在，含量约为3%～5%。因此，利用微生物与中药栀子共发酵生产京尼平具有非常重要的意义。 　　微生物转化栀子的原理即利用β葡萄糖苷酶的产生菌与栀子进行共发酵，在β葡萄糖苷酶的作用下，使京尼平苷的糖苷键断裂而生成京尼平。 　　本文利用一株产β葡萄糖苷酶的青霉Penicillium nigricans与栀子共发酵，确立了发酵最优条件，进行了发酵动力学的研究，阐明了发酵过程中酶活变化与京尼平苷转化的关系，分离纯化了产物，并对产物进行了性质和结构鉴定。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料 　　菌种为本实验室从自然界分离得到，经鉴定为一株黑青霉Penicillium nigricans，编号为MK-1。 　　栀子果实购于成都同仁堂药店。京尼平购自安徽DELTA天然有机化合物信息中心。薄层色谱预制板硅胶G（福山生化试剂厂），其余试剂均为市售分析纯。 　　GBRT全自控10L发酵罐(烟台高新区海洋