毛葡萄叶水提物对血栓形成和血黏度的影响_药学论文.docVIP

毛葡萄叶水提物对血栓形成和血黏度的影响_药学论文 毛葡萄叶水提物对血栓形成和血黏度的影响_药学论文 作者：荆春霞，周芃，杨亚安，王旻晨，王晓春，吴开云 【摘要】 目的探讨毛葡萄叶水提物对血栓形成和血黏度影响并研究其主要作用机理。方法用大鼠动静脉旁路血栓形成模型观察血栓的形成 ,测定血栓湿重及干重；放射免疫法测定TXB2和6-keto-PGF1α水平；用血瘀血液流变学模型测定全血黏度。结果毛葡萄叶水提物可剂量依赖性抑制大鼠血栓形成,其血栓干重及湿重与对照组相比均显著降低(0.05或0.01 )，有降低血浆TXB2和升高6-keto-PGF1α水平，对血液黏度也有明显降低作用。结论毛葡萄叶水提物有明显抗血栓形成和降低血黏度作用，其机制可能与影响血浆TXB2和6-keto-PGF1α含量水平有关。 【关键词】 毛葡萄叶水提物; 血栓; 模型; 大鼠; 血栓素B2; 前列环素; 血粘度 临床上由血栓引起的心、脑血管病发病率逐年增加，寻找有效的抗血栓药是这一领域的研究热点。近来研究表明从中草药中寻找具有抗血栓作用的药物具有良好的发展前景。毛葡萄Vitis quinquangularis Rehd，为木质藤本植物，味酸、微苦，性平,根皮和叶可作药用，有调经活血、舒筋活络作用，外用治跌打损伤、筋骨疼痛，外伤出血等［1］。现有的文献资料中并未发现毛葡萄及其提取物具有抗血栓的作用，本实验采用被广泛用于抗血栓药物的研究动静脉旁路模型和急性血瘀血流变学模型［2，3］，首次发现毛葡萄叶水提物有明显抗血栓形成和降低全血血黏度的作用（已申请发明专利，申请号：200810025205.X），并对其主要作用机制进行了探讨。现报道如下。 　　1 材料与仪器 　　1.1 动物SD大鼠,♀♂各半， 体质量(250±20)g，苏州大学实验动物中心供应，SPF级,实验动物生产许可证号:XCYK(苏)2002-0008,实验动物使用许可证号:SYXK(苏)2002-0037。 　　1.2 仪器 　　电子精密天平（上海奥豪斯公司）；DK-600型电热恒温水槽；TDL80-2B型台式离心机（上海安亭科学仪器制造厂）；LEICARM2126RT石蜡切片机（上海徕卡仪器有限公司）；OLYMPUS CX31显微镜（日本OLYMPUS公司） ；TYXN-96多功能智能血液凝聚仪 ；γ放免计数仪 FJ-2003/50A。 　　1.3 药品及试剂 　　毛葡萄叶水提物制备：取500 g干毛葡萄叶（来源：江西，苏州大学生药研究所鉴定），浸泡于水中，加热提取3次，45 min/次，合并提取液用蒸发浓缩至1 000 ml，再用终浓度为50%乙醇沉去杂质，过滤后用旋转蒸发除去乙醇，浓缩后的溶液经冷冻干燥后得到粉末状提取物150 g（批号为：KXSH-T1），主要成分为黄酮（25% ），还含有酚类、氨基酸等。实验时配成30%(约含生药1g·ml-1)；血栓素B2(thromboxane B2,TXB2)和6-酮-前列腺素F1α(6-keto-prostaglandinF1α, 6-keto-PGF1α)放射免疫测定试剂盒购自苏州大学江苏省血液学研究所，复方丹参滴丸(compound dan shen dripping pills, CDDP ),天津天士力制药股份有限公司产品，规格为每粒27mg，批号批准文号：国药准字 盐酸肾上腺素注射液 1mg/ml上海禾丰制药有限公司 批号 070902,其它试剂均为市售国产分析纯。 　　2 方法 　　2.1 动静脉旁路血栓模型与给药分组 　　SD大鼠50只，♀♂各半， 体质量(250±20)g，分为对照组，中药(VRE)大、中、小剂量组和丹参(CDDP)组各10只，各组动物分养。大剂量中药组每天灌中药4 ml（4g·kg-1）；中剂量中药组每天灌中药4 ml（2g·kg-1）；小剂量中药组每天灌中药4 ml（1 g·kg-1）；对照组灌生理盐水4 ml每只；丹参组（70 mg· kg-1）。连续灌胃9 d；第10天于灌胃1 h后按血栓模型过程行动静脉旁路术。 　　2.2 动静脉旁路模型的建立 　　3.6%水合氯醛1ml·100 g-1麻醉后固定于解剖台上，准备好一根塑料管（d=0.3 mm）两端拉细，管中放置一根6 cm的4号线，并灌满50 U·ml-1肝素。分离右侧的颈总动脉和左侧的颈外静脉。静脉端先结扎静脉远心端，剪开一个小口，将管向近心端插入并结扎固定。动脉端先用血管夹夹住近心端，剪开一个小口，将管向近心端插入并结扎固定。然后放开血管夹，保证血流通畅，计时20 min后将线取出［2］。分别称量栓线的湿重和干重，将形成的血栓固定、包埋，切片、HE染色，观察血栓成分。并腹主动脉取血，离心2 000 r/min，取