白细胞介素6对HL-60细胞NF-κB p65活性的影响_医学论文.docVIP

白细胞介素6对HL-60细胞NF-κB p65活性的影响_医学论文 白细胞介素6对HL-60细胞NF-κB p65活性的影响_医学论文 【关键词】白细胞介素 　　摘要:目的研究白细胞介素6（interleukin-6，IL-6）对粒细胞白血病细胞系HL-60核因子-κBp65（NF-κBp65）活性的影响，以探讨IL-6在白血病发生、发展中的作用。方法指数生长期HL-60细胞置于96孔培养板内RPMI-1640培养液培养2h后，分为A、B2组。A组加PBS液继续培养3hB组分别加0.5、5、50μg.L的IL-6继续培养3h。用流式细胞仪（FCM）检测HL-60细胞NF-κBp65的活化率。结果IL-6浓度为5、50μg.L时诱导的HL-60细胞NF-κBp65活化率分别为（16.81±2.73）%、（22.37±4.29）%，与对照组（8.44±2.20）%相比差异有统计学意义（0.05）IL-6浓度在0.5μg.L时NF-κBp65活化率为（8.69±1.61）%，与对照组相比差异无统计学意义（Pgt0.05）3种IL-6浓度组间的NF-κBp65活化率比较差异有统计学意义（0.05）。结论IL-6有诱导HL-60细胞NF-κBp65活化的作用，且存在剂量依赖趋势。 　　关键词:白细胞介素6HL-60细胞核因子-κBp65活化 　　Abstract:ObjectiveToexploretheeffectsofinterleukin-6（IL-6）ontheactivityofnuclearfactorkappaBp65（NF-κBp65）inHL-60cells.MethodsAfterbeingculturedinRPMI-1640for2h，theHL-60cellsweredividedintoAandBgroups.Theculturewascontinuedfor3h，withPBSbeingaddedinthemediaofgroupA，andIL-6.0.5，5and50μg.LaddedinthemediaoftherespectivesubgroupsofgroupB.TheactivationofNF-κbp65ofHL-60cellswasdeter-minedbyflowcytometry（FCM）.ResultsTheratesofactivationofNF-κBp65inHL-60cellsculturedwithIL-65and50μg.Lwere（16.81±2.73）%and（22.37±4.29）%，respectively，higherthanthecontrol（8.44±2.20）%（0.05）.Theactivationwas（8.69±1.61）%inthecaseofIL-60.5μg.L，differentfromthecontrolinsignificantly（Pgt0.05）.ConclusionIL-6increasestheactivationofNF-κBp65ofHL-60cellsindose-dependentmanner. 　　Keywords:interleukin-6HL-60cellsnuclearfactor-κBp65activation 　　急性白血病是儿童最常见的恶性肿瘤，是一组恶性克隆性疾病，年发病率（3～4）.10万，每年新增病例至少1万例。目前，治疗儿童白血病的方法主要是化疗。随着化疗方案的不断改进，不少小儿白血病的预后已有明显改善，其中小儿急性淋巴细胞白血病5年无病生存率（eventfreesurvival，EFS）从20世纪70年代的几乎是0提高到目前的70%以上。然而复发和耐药一直困扰着医务工作者，因此仍然需要不断探索，以进一步提高白血病患儿的长期无病生存率及生活质量。 　　1材料和方法 　　1.1材料和仪器HL-60细胞购自中国医学科学院基础医学研究所，兔抗人NF-κBp65单克隆抗体（一抗）、羊抗兔单克隆抗体（二抗）、IL-6均购自北京莱博生物实验材料有限公司。流式细胞仪为美国Calibur公司产品。 　　1.2方法 　　1.2.1细胞传代HL-60细胞在RPMI-1640培养基（含15%胎牛血清，2g.L碳酸氢钠，300mg.L葡萄糖，青、链霉素各200U.L）中传代培养，每3～4天传代1次。培养条件:5%CO2，饱和湿度，37℃。 　　1.2.2HL-60细胞NF-κBp65活化指数生长期HL-60细胞1×106.L，置于96孔培养板内，每孔各1ml培养2h后，分为2组。A组加PBS液0.1mlB组又分为3组，分别加入终浓度为0.5、5、50μg.L的IL-6各0.1m