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NK细胞体外制备 （流程篇） 深圳市汉科生物工程有限公司 jinpeng@hankbio.org NK细胞体外制备流程图 NK细胞体外制备 The End 谢 谢！ ①——血样来源：健康亲属，②——污染：细菌、真菌、支原体，③——补液依据：根据培养液颜色判断补液，使总细胞浓度在0.5-1.0×106 Cell/ml，④——培养液体积大于50ml时换T175培养瓶当培养液体积大于200ml时，转入培养袋，⑤培养过程中所涉及到的设备 血样(50ml) 梯度密度离心 离心提取白膜层 淋巴细胞分离液 细胞分离：PMBC外周血 单个核细胞，约得4~10×107 的单核细胞(PBMC) 第3天： 离心、换液、换瓶 第7天：细胞计数， 根据计数情况 添加培养液A3 第12天：质检， 细胞数量、纯度、 污染、杀伤力 指标合格 第14天：收集 全部细胞， 同时留样备查 回 输 第13天：根据第12天的质检结果，作相应处理， 若存在质检部分指标不合格的情况，按不合格 产品处理，若合格如下 建议每份以4×107的 PBMC平行培养，每天 观察培养情况，视况进行 补液、换瓶、转袋等相关操作 T75：4×107PBMC、 培养液A3、培养液40ml ①——血样来源：健康亲属，②——污染：细菌、真菌、支原体，③——补液依据：根据培养液颜色判断补液，使总细胞浓度在0.5-1.0×106 Cell/ml，④——培养液体积大于50ml时换T175培养瓶当培养液体积大于200ml时，转入培养袋，⑤培养过程中所涉及到的设备 * *
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