紫外-可见分光光度法标准操作规程.docVIP

紫外-可见分光光度法标准操作规程 1 简述 3 紫外-可见分光光度计的检定 3.1 波长准确度 3.1.1 3.1.2 波长准确度检定方法 3.1.2.1 用低压汞灯检定 关闭仪器光源，将汞灯(用笔式汞灯最方便)直接对准进光狭缝，如为双光束仪器，用单光束能量测定方式，采用波长扫描方式，扫描速度“慢”(如15nm/min)、响应“快”、最小狭缝宽度(如0.1nm)、量程0～100%，在200～800nm范围内单方向重复扫描3次，由仪器识别记录各峰值(若仪器无“峰检测”功能，必要时可对指定波长进行“单峰”扫描)。 单光束仪器以751G型为例，可将选择开关放在×0.1位置，透光率读数放在100(或选择开关放在×1，透光率放在10)，关小狭缝，打开光闸门，缓缓转动波长盘，寻找汞灯546.07nm峰出现的位置，若与波长读数不符，应调节仪器左侧准直镜的波长调整螺丝，如波长向短波长方向移动，应顺时针方向旋转波长调整螺丝，如向长波长方向移动，则应反时针方向旋转波长调整螺丝，调整好后，再按汞灯的下列谱线测试，记录每条谱线与仪器波长读数的误差。 用于检定紫外-可见分光光度计的汞灯谱线波长：237.83，253.65，275.28，296.73，302.15，313.16，334.15，