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第8章 核移植技术与动物克隆 8.1 核移植技术 8.2 核移植技术的应用 克隆(clone)是指用无性方式产生的后代群体。 什么是动物克隆？ 动物克隆是一种通过核移植过程进行无性繁殖的技术。 经过核移植而产生的动物，其遗传结构与细胞核供体完全相同。 这种不经过有性生殖过程，而是通过核移植生产遗传结构与细胞核供体相同动物个体的技术，就叫做动物克隆。 动物克隆技术 动物克隆技术包括细胞核移植技术和卵裂球培养、胚胎分割技术。 细胞核移植技术是核心技术 8.1 核移植技术 所谓核移植技术就是利用显微操作技术将外源细胞核移入去核卵母细胞中，再移植入代孕母体内，使其发育为含有与供体细胞相同遗传物质的个体。从而可能创造无性杂交生物新品种的一项技术。 8.1.1研究概况 1938年Spemann最先提出将多细胞胚胎的每一个细胞核移植到去掉核的卵母细胞中，使它们重新发育成胚胎的设想。 1952年，Briggs和King沿用Spemann的思路和实验技术，首次获得两栖动物美洲豹蛙胚胎细胞核移植的后代． Hans Spemann (1869-1941) Robert Briggs (1911-1983) Thomas King (1921-2000) 1962 John Gurdon claims tohave cloned frogs from adult cells. 2. 鱼类的核移植 　　　从1961年开始，童第周等以金鱼和鳑鮍鱼为材料，进行鱼类不同亚科间的细胞核移植获得成功， 童第周 1979年，中国科学院武汉水生物研究所利用鲫鱼做移核试验。他们把鲫鱼囊胚期细胞经过385天59代连续传代培养后，再将此种培养细胞的细胞核移植到同种鲫鱼的未受精卵中。到1980年4月，他们成功地培育了两尾无性繁殖的幼鱼，其中一条发育正常。 1989年，童第周、牛满江又将鲫鱼胚胎细胞核移入鲤鱼去核的未受精卵中，实现了不同种间的核质杂交，成功地无性繁殖了“鲤鲫核鱼”新品种。 3. 哺乳类的细胞核移植 1977年，美国缅因州巴尔港的杰克逊实验室用“亚无性繁殖”的方式，培育出7只单亲小鼠。 In 1984, Steen Willadsen cloned the first farm animal, a sheep. 克隆技术发展大事记 1995 年用一只母羊的胚胎细胞克隆两头绵羊（苏格兰） 1996 年人类历史上首次克隆哺乳动物“多莉” （苏格兰） 1997 年克隆带有一个人类基因的绵羊“波莉” （苏格兰） 1998 年克隆3代50只实验鼠（美夏威夷） 1999 年克隆3头山羊，使它们的乳液中含有一种对心脏病具有疗效作用的蛋白质（美马萨诸塞洲） 2000 年用早期胚胎细胞克隆恒河猴 2001 年11月首次克隆早期阶段的人类胚胎 2002年4月6日（意）安提诺里宣称对5000对夫妇的克隆计划已有一妇女怀孕8周 2002年12月26日（法）布瓦瑟利耶宣布第一名克隆女婴降生 2003：中科院动物所研究员周琪在法国克隆大鼠成功 中国2003年10月8日凌晨3时18分，国际上首例冷冻克隆牛胚胎移植犊牛“蓓蓓”在山东省莱阳农学院出生。 中国体细胞克隆牛泰斗陈大元 克隆大熊猫 2004:中国首例异体克隆动物“北山羊”降生 2005:我国第一头体细胞克隆猪克隆小香猪 广西大学动成功地繁殖了一只胚胎细胞克隆兔，比普通兔大许多 世界首例体细胞克隆水牛在广西大学诞生 下一个：人类克隆？Human Cloning 世界上第一只胚胎细胞克隆猴“泰特拉”2000年1月在美国诞生 克隆羊与体细胞核移植 8.2.2 克隆技术存在的问题 理论问题 分化的体细胞克隆对遗传物质重编（细胞核内所有或大部分基因关闭，细胞重新恢复全能性的过程）的机理还不清楚； 克隆动物是否会记住供体细胞的年龄。 克隆动物的连续后代是否会累积突变基因。 在克隆过程中胞质线粒体所起的遗传作用等问题还没有解决。 实践问题 　胎儿或新生儿死亡率极高 生出的部分个体表现出生理或免疫缺限。 极少数能全程发育的个体也表现为超重、呼吸系统疾病等异常表型 个别表型正常者也存在有免疫缺陷、关节炎或肾、脑畸形等问题,导致克隆动物后期死亡 即使是正常发育的“多莉”，也被发现有早衰迹象 除了以上的理论和技术障碍外，克隆技术（尤其是在人胚胎方面的应用）对伦理道德的冲击和公众对此的强烈反应也限制了克隆技术的应用。 作 业 课后题2、4 第一步 取妊娠期的6岁母绵羊（Finn Dorset白品种母羊）的乳腺细胞作核供体细胞，用饥饿法使其进入休眠状态而使全部基因具有活性。 第二步注射促性腺