超滤技术在多糖提取中的应用研究2.docVIP

1 前言 1. 1多糖的应用现状 多糖作为药物始于1943年，50年代发现真菌多糖具有抗癌作用，后来又发现地衣、花粉及许多植物均含有多糖类化合物，并进行分离提纯，确定了其化学结构、 物理化学性质、药理作用，尤其对多糖类化合物的抗肿瘤和免疫增强作用进行深入研究，到了60年代作为广谱免疫促进剂而引起了医药界的广泛关注，并逐渐认识到多糖及复合物分子具有极其重要的生物功能。1995年3月，亚洲分子生物学组织 （AMBO）在日本举办了“糖生物学和糖工程” 培训班。越来越多的研究证明，多糖不但能治疗机体免疫系统受到严重损伤的癌症，还能治疗多种免疫缺损疾病，如慢性病毒性肝炎和某些耐药细菌和病毒引起的慢性疾病，以及诸如风湿病之类的自身免疫疾病，有的还能诱导干扰素的产生。同时，作为药物的多糖在治疗肿瘤时，不像一般化疗药物直接杀死生长着的肿瘤细胞，而是促进细胞和体液免疫反应，如激活补体、巨噬细胞、T-淋巴细胞、B-淋巴细胞或加强抗体生成等，以达到抑制和消灭肿瘤细胞的作用，对正常细胞影响很小。如研究表明，紫草和枸杞多糖具有抗突变、抗衰老、增强免疫功能的作用；枸杞多糖等可抵抗自由基过氧化；铁筷子多糖能提高抗氧化酶活性，从而减轻自由基对机体损伤的作用；牛膝、人参多糖可提高小鼠天然杀伤细胞（NKC）的活性，诱生 肿瘤坏死因子（TNF）；香菇、商陆、松果、柴胡、云芝多糖可激活巨噬细胞，从而抑制肿瘤生长；从三七、防风、甘草、刺五加中提取的多糖类化合物能激活网状内皮系统，发挥抗肿瘤作用；灵芝多糖通过活化巨噬细胞和蛋白激酶C（PKC）而发挥免疫增强作用等等。 目前，已有部分天然多糖类化合物用于临床，显示出良好疗效，且无骨髓抑制等不良反应，可长期应用，预示了它抗肿瘤方面的良好发展前景。同时，多糖在治疗肿瘤、代谢及感染性疾病等方面的应用仍在不断扩大，给近代肿瘤、艾滋病及其它疾病的治疗开辟了新的方向。 2超滤技术的优点 超滤是一种膜分离技术，所采用的超滤膜能够从水和其他液体中分离出很小的胶体和大分子。由于超滤膜具有不对称微孔结构，且采用磨擦流道和湍流促进结构，减少膜污染，使得在分离过程中大分子溶质和微粒（如胶体，淀粉等）随溶 液切向流经膜表面，而小分子物质和溶剂则在压力驱动下穿过致密层上的微孔而进入膜另一侧，因而超滤膜可以长期连续使用并保持较恒定的产量和分离效果。将超滤膜用于多糖这种生物活性物质的分离，具有不损害活性、分离效率高、能耗低、设备简单、可连续生产、无污染等优点。 2 分离原理及影响因素 2. 1超滤原理 超滤(UF)是以压力差为推动力的膜分离过程。超滤膜分离主要是依据筛分原理，根据膜的截流分子量不同进行分离。当液体混合物在一定压力下流经膜表面时，膜表面的微孔结构对物质进行选择性分离，小分子透过膜得到超滤液，而大分子物质则被截留，使原液中大分子浓度逐渐提高得到浓缩液，从而实现大、小分子的分离、浓缩、净化的目的[1]。 2．2超滤孔径 超滤膜的孔径一般在1～100 nm之间，能够截留分子量300～500 ooO Da的物质，包括多糖、生物分子、聚合物和胶体物质等。大多数超滤膜以其标称分子量(MWCO)来描述其基本特性，膜标称的切割分子量一般定义为膜具有90％以上截留率的最小分子量。 2. 3影响分离因素 2. 3. 1料液流速 为控制浓差极化、维持有效操作常采用错流方式使料液沿与膜平行的方向流动籍此产生较高的剪切力，使沉积在膜表面的颗粒返回料液主体以保持滤饼层处于较薄的水平。研究表明，提高料液流速可有效降低滤饼层厚度，保证膜通量和分离效果。当料液处于湍流状态时其传质系数较层流状态高得多[2]。但稳态的湍流状态仍有不足，不稳定的湍流状态强化过滤则效果更好[3]。 2. 3. 2操作压力 压力是超滤过程的原始驱动力和重要影响因素，实验研究表明当料液为小分子溶液时，操作压力与膜通量呈线性关系；若待处理料液为大分子溶液。超滤初始阶段膜通量随压力的增高而增大，达到一定程度时通量增大趋势减缓呈平缓的平台曲线，当膜通量不再随压力的增高而增大时的操作压力称为临界压力。较压力临界值很低的压力可减少膜面污染，但膜通量较小延长工时；而压力大于临界值易在膜面形成凝胶化的滤饼层降低其通透性甚至改变膜的截留性能，可能会造成膜被压实、瘪塌、断裂，同时过高的压力会显著增加动力消耗”[4]。可见压力的选择不仅关系膜性能，也涉及膜的污染和能耗等问题，因此综合考虑对于一个确定的体系常采用临界压力作为操作压力，既可减轻膜面污染又能维持较高的膜通量[5]。 2.3.4温度 在所有操作参数中对超滤影响最大的是温度，这已被很多实验所证实[6]。随料液温度的升高，料液中分子运动加剧，各成分的吸附，包合、氢键等多种作用力随之减弱，可使其黏度降低，同时溶液扩散系数，传质系数增大，膜通量增加。但过高的温度会使