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探究温度对酶活性影响的实验设计 遵义县团溪中学 “新陈代谢与酶是高中生物学的一个重要内容，学生必须通过实验探究酶的活性及其特征，为此，我先后尝试用唾液淀粉酶催化水解，过氧化氢酶催化H2O2分解来研究温度和PH值对酶活性的影响，但实验效果不佳，于是我对此实验作了改进，取得了良好的实验效果，其具体实验方案如下： 一、实验目的 1、学会探索影响酶活性因素的方法。 2、探索a—淀粉酶不同温度下催化淀粉水解的情况。 二、实验原理 淀粉遇碘后，形成蓝紫色复合物，a—淀粉酶可以催化淀粉逐步水解成麦芽糖和葡萄糖，麦芽糖和葡萄遇碘后不显色。 三、实验材料和用具 试管12支，试管刷1把，试管架1个，刻度吸管2支，恒温水浴箱2台（水温分别保持在60℃、100℃）、塑料烧杯1个（冻冰）铅笔1支，1%淀粉溶液，0.1%a—淀粉酶溶液，卢戈氏碘液四、实验准备 1、实验前教师应配制好1%淀粉溶液和0.1%的a—淀粉酶溶液，卢戈氏碘液。 2、课前90min，打开2个温水浴箱，并调好温度。 五、实验步骤和实验记录 温度对淀粉酶活性的影响 处理Ⅰ 处理Ⅱ 处理Ⅲ 1A 1B 1C 1D 2A 2B 2C 2D 3A 3B 3C 3D 酶促反应 1.0%淀粉2ml + + - - + + - - + + - - 0.1%a-淀粉酶1ml - - + - - - + - - - + - 蒸馏水1ml - - - + - - - + - - - + 实验预处理 2℃/5min 60℃/5min 96℃/5min 酶-反应 每组将预处理试管A中底物和试管C中酶混合、试管B中底物和试管D中蒸馏水混合，分别在各自温度下再保温5min 鉴定反应 鉴定实验 1滴碘液 1滴碘液 1滴碘液 1A+1C 1B+1D 2A+2C 2B+2D 3A+3C 3B+3D 溶液颜色 色 色 色 色 色 六、实验结论：在不同温度下a-淀粉酶的活性不同，低于最适温度，a-淀粉酶的活性没有全部释放，高于最适温度a-淀粉酶的活性随着温度的升高而消失。从以上实验表格可知，在2℃时，a-淀粉酶的活性最低，在60℃时，a-淀粉酶的活性最高，即60℃为最适温度，在96℃时，a-淀粉酶活性完全丧失。 七、说明： 1）对照组均为深蓝色，实验组中冰水组颜色为深棕色，60℃时为黄色，100℃时为深蓝色。 2）水浴箱水温100℃时，敞开盖后只能维持96℃。所以测定的是96℃下酶的活性，但也可以观察到明显现象。 3）水浴锅要保持水温60℃时，应设定在61℃，敞开盖时的实际温度为60.1℃左右。 性 应 反 号 编 管 试