（定性和定量方法） - 上海谱宁分析技术有限公司.doc

16种塑化剂的高效液相色谱分析方法 塑化剂是邻苯二甲酸酯类化合物，塑化剂超标会损害男性生殖能力、促使女性性早熟、伤害免疫和消化系统，对人体造成很大的危害。塑化剂进入人们的视野最初是2011年的台湾“昱伸香料有限公司”的“起云剂”事件，当时他们是在产品中恶意添加了邻苯二甲酸二-(2-乙基)己酯（DEHP）。自酒鬼酒中检测出塑化剂含量超标以来，陆续出现多个品牌白酒的塑化剂超标，其中包括茅台、五粮液等知名品牌，许多品牌塑化剂超标甚至高达200%以上，引起人们对食品安全的担忧和恐慌。对此次白酒中塑化剂超标事件上海谱宁分析技术有限公司高度关注，并携手上海伍丰科学仪器有限公司开发出检测16种常见塑化剂的分析方法。 本方法分为两个部分：第一部分用于定性分析，可以检测在样品中是否含有16种塑化剂的某些成份，检出限为1ug/ml，并根据可能的存在成份选择第二部分中的定量分析方法；第二部分用于定量分析，定量分析方法具有分离度好、基线平稳、重现性好等特点，可满足定量分析的要求。 一.定性分析方法 液相色谱仪：LC100 二元高压梯度系统（上海伍丰科学仪器有限公司） 色谱柱：PntulipsTM BP-C18, 5um, 4.6×250mm（上海谱宁分析技术有限公司） 流动相：梯度 时间（min） A相：水/乙腈＝60/40 B相：甲醇/乙腈＝60/40 0 100 0 3 100 0 21 50 50 45 30 70 60 0 100 67 0 100 68 100 0 波 长：UV, 242 nm 温 度：柱温30℃ 进样量：20ul 标准溶液的配制： 准确称量16种邻苯二甲酸酯标准品，用乙腈配制成浓度为100ug/ml的标准溶液。 流动相A的配制：准确量取200ml乙腈和300ml水，混合均匀，超声脱气5min。 流动相B的配制：准确量取200ml乙腈和300ml甲醇，混合均匀，超声脱气5min。 按出峰顺序： 序号 出峰时间(min) 中文名 英文名 英文缩写 1 11.24 邻苯二甲酸二-(2-甲氧基)乙酯 Bis(2-methoxyethyl) phthalate DMEP 2 11.81 邻苯二甲酸二甲酯 Dimethyl phthalate DMP 3 18.60 邻苯二甲酸二-(2-乙氧基)乙酯 Bis(2-ethoxyethyl) phthalate DEEP 4 19.18 邻苯二甲酸二乙酯 Diethyl phthalate DEP 5 33.42 邻苯二甲酸二苯酯 Diphenyl phthalate － 6 37.59 邻苯二甲酸二异丁酯 Diisobutyl phthalate DIBP 7 38.13 邻苯二甲酸丁基苄基酯 Benzyl butyl phthalate BBP 8 39.08 邻苯二甲酸二丁酯 Dibutyl phthalate DBP 9 39.62 邻苯二甲酸二-(2-丁氧基)乙酯 Bis(2-n-butoxyethyl)phthalate DBEP 10 51.10 邻苯二甲酸二戊酯 Dipentyl phthalate DPP 11 52.02 邻苯二甲酸二环己酯 Dicyclohexyl phthalate DCHP 12 56.08 邻苯二甲酸二-(4-甲基-2-戊基)酯 Bis(4-methyl-2-pentyl)phthalate BMPP 13 58.34 邻苯二甲酸二己酯 Dihexyl phthalate DHXP 14 64.35 邻苯二甲酸二-(2-乙基)己酯 Bis(2-ethylhexyl) phthalate DEHP 15 65.64 邻苯二甲酸二正辛酯 Di-n-octyl phthalate DNOP 16 邻苯二甲酸二壬酯 Dinonyl phthalate DNP 注意事项： 1. 色谱柱的维护（本方案仅针对做该样品时的维护）：分析完成后用B相以1.0ml/min 冲洗45min。 二.定量分析方法 上述定性分析方法虽然可以同时分析16中塑化剂，但白酒中塑化剂的含量相对浓度并不是很高（国标规定可允许上限约为0.3mg/kg），虽经过固相萃取后浓度也不会太大，因此用于定量时基线漂移可能会带来较大影响，同时二壬基酯和二辛基酯未能实现分离。据此特开发出基线更平稳、检出灵敏度更高、更适合定量的分析方法。 本方法开发之初是想要同时分析所列的16种塑化剂，开发过程中发现两个问题，一是有四个组分靠得太近，要同时确保它们基线分离甚至分离度大于1.0都非常困难，尝试过上百个方案也未能实现； 二是最后面出来的两个化合物DNOP和DNP在常规条件下难以分离，因此，不得已放弃同时分析16种的方案，开发出一个总的分析方法