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两类药物对体外培养猪囊尾蚴细胞膜代谢的影响1 李庆章，郝艳红，高学军，刘永杰，高文学，赵冰 东北农业大学生命科学学院（150030） E-mail: qzli@ 摘 要：为研究苯并咪唑氨基甲酸酯类和苯脒类药物抗猪囊尾蚴效果及作用机理，筛选有效 的抗猪囊尾蚴药物，本实验通过检测脂类物质含量、糖-唾液酸含量变化、膜流动性变化， 对体外培养猪囊尾蚴经阿苯哒唑、奥芬哒唑和三苯双脒分别作用后细胞膜代谢进行了研究， 以确定两类药物对体外培养的猪囊尾蚴细胞膜代谢的影响。结果表明，奥芬哒唑对体外培养 的未成熟期和成熟期猪囊尾蚴细胞膜代谢均有抑制作用，阿苯哒唑只抑制成熟期猪囊尾蚴细 胞膜代谢；三苯双脒对未成熟期和成熟期猪囊尾蚴细胞膜代谢均无抑制作用。 关键词：猪带绦虫囊尾蚴，体外培养，苯并咪唑氨基甲酸酯类药物，苯脒类药物，细胞膜代 谢 1. 引 言 猪囊尾蚴病 （Cysticercosis cellulosae ）又称猪囊虫病，是由于人或猪等中间宿主误食猪 带绦虫 （Taenia solium）的虫卵而引发的一种人畜共患寄生虫病。人患猪囊尾蚴病后，尚无 有效的药物治疗，主要原因是尚缺乏有效杀灭未成熟期猪囊尾蚴的药物。该病至今在世界各 地发展中国家仍严重危害着人民的健康甚至危害生命[1~3] 。苯并咪唑氨基甲酸酯类和苯脒类 药物是目前治疗寄生蠕虫病的重要药物，其作用机理可能是通过影响虫体细胞膜代谢从而导 致虫体能量摄入障碍并最终导致虫体能量代谢衰竭而死亡[4,5] 。因而研究阿苯哒唑 （albendazole，ALB ）、奥芬哒唑 （oxfendazole，OXF ）和三苯双脒 （thibendimidine，THI ） 等药物对体外培养的猪囊尾蚴细胞膜代谢的影响，不仅可为探讨此类药物的作用机理提供实 验依据，还可为筛选抗囊新药提供简便、快捷和有效的实验方法。 2. 材料与方法 2.1 实验材料 2.1.1 猪六钩蚴 将猪带绦虫排出的新鲜、成熟的孕卵节片 （哈尔滨医科大学寄生虫学教研室、吉林农业 [6] 大学囊虫病研究所提供）进行体外培养 。 2.1.2 猪囊尾蚴 将未成熟期和成熟期猪囊尾蚴（经本室人工成功感染长白与哈白杂交家猪后分期剖杀猪 [6,7] 获得）。进行体外培养 。 1基金项目：国家自然科学基金资助项目（No） ﹡通讯作者：Tel: 0451 E-mail ：qingzhangli@ 。 - 1 - 2.2 实验药物 ALB 、OXF 和 THI （中国农业科学院上海寄生虫病研究所惠赠）各 40mg，分别溶于 0.4ml 二甲基甲酰胺中，配成 100mg/ml 的药液，使用时稀释药液使其终浓度为400µg/ml 。 2.3 实验方法 2.3.1 药物体外对未成熟期和成熟期猪囊尾蚴的作用 3组药物ALB 、OXF、THI及对照 （C ）组 （加入与用药组等体积的二甲基甲酰胺）分别 加入培养5 日的猪六钩蚴、刚培养的在猪体内发育30 日时剖杀猪所取的猪囊尾蚴及成熟期（60 日后）猪囊尾蚴的培养基中。分别于用药后72h检测猪六钩蚴、猪囊尾蚴细胞膜代谢变化[6] 。 2.3.2 细胞膜代谢变化的检测 采用高效液相色谱法 （LC-10AT，Shimadzu ）分析猪囊尾蚴细胞膜磷脂组分磷脂酰乙醇 胺（PE ）、磷脂酰胆碱 （PC ）、磷脂酰丝氨酸 （PS ）和鞘磷脂（SP ）；采用荧光分光光度 法（RF-540 ，Shimadzu ）检测猪囊尾蚴细胞膜荧光偏振度 （P ），并按公式计算微黏度 （η）、 各向异性 （γ）和膜流动度 （LFU ）；猪囊尾蚴细胞膜ATP酶（ATPase ）活性检测按照检测 试剂盒 （南京建成生物工程公司）操作方法进行；应用自动生化分析仪 （AEROSETM ，美国 雅培公司）检测总胆固醇（CHO ）、低密度脂蛋白（LDL-C ）和三酰基甘