分子标记技术在小麦叶锈菌DNA多态性的研究中的应用.pdfVIP

研究论文 103 分子标记技术在小麦叶锈菌DNA 多态性研究中的应用’ 王佳映1·2 刘太国1 何月秋2 陈万权1“ (1中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室， 北京100094；2云南农业大学，昆明650201) 摘要：锈菌生理小种毒性的改变是导致抗锈小麦品种“丧失”抗性的主要原因，小种 的划分主要是依据病茵对寄主苗期致病性的差异，是对基因的间接反映，不能真实地反应其 亲缘关系。随着分子生物学技术的发展，在分子和基因水平认识真菌群体的遗传结构、组成 和分类成为可能。笔者主要介绍了分子标记技术的原理、方法、特点及其在小麦叶锈茵遗传 多样性、小种的分类鉴定及小种间亲缘关系等研究中的应用。同时对分子标记技术在小麦叶 锈茵上的应用前景进行了展望，以期对小麦叶锈茵分子鉴定体系的建立有所帮助。 关键词：小麦叶锈菌；分子标记；应用 小麦叶锈病Puccinia triticinaf．sp．tritici(原名Pucciniarecondita)是影响小麦安全生产 的一类重要病害，一直受到国内外许多植物病理学者和小麦育种工作者的高度重视。．锈菌 生理小种毒性的改变是导致抗锈小麦品种“丧失”抗性的主要原因，因此弄清叶锈菌群 体的毒性基因结构、分布及频率变化，是开展小麦品种抗病基因分析的基础，同时对于指 导小麦抗锈育种和抗病基因合理布局等也有重要意义。长期以来，中国锈菌小种监测都是 基于鉴别寄主品种(系)的活体鉴定，费工费时。小种的划分主要是依据病菌对寄主苗 期致病性的差异，是对基因的间接反映，不能真实地反应其亲缘关系…。随着分子生物学 技术的发展，在分子和基因水平认识真菌群体的遗传结构、组成和分类成为可能，比较分 析小麦叶锈菌分子遗传多态性和毒性，建立锈菌生理小种分子鉴定体系，对揭示锈菌毒性 基因及其结构的变异规律，评价小麦抗锈基因的寿命以及预测锈菌群体变异动态，筛选和 鉴定抗病资源都有重要作用。 广义的分子标记包含蛋白质标记和DNA标记，目前所说的分子标记多指狭义的分子 息量大，许多多态性标记在非编码区表现选择“中性”，不受内外环境影响，与基因表达 与否无关，检测迅速，操作方便。由此可见，DNA分子标记是目前较理想的遗传标记， 为人们正确认识植物病原真菌的系统发育和起源提供了一个前景广阔的手段。 163．corn ippcaas．cn 植物保护与现代农业 许多分子标记技术已被引入到了病原真菌研究的各个方面，其应用潜力不断被挖掘出 来，应用优势也Et益上升。已有学者将分子标记技术在植物真菌病害川、植物真菌遗传 多样性‘31等方面的应用进行了详尽的综述。本文主要对分子标记技术近年来在小麦叶锈 菌遗传多样性方面的研究做一回顾。 1 蛋白质标记——同工酶标记技术在小麦叶锈菌研究中的应用 应而结构不同的酶的多种分子类型，具有明显的种属、组织和发育阶段的特异性。同工酶 作为一种生化指标，已广泛应用于物种鉴定、物种间亲缘关系比较及系统分类、基因连锁 分析和基因作图、进化理论、个体发育过程中的基因表达与调控、环境生理、杂交育种以 及种群遗传结构分析等理论研究和实际应用领域。同工酶技术是通过电泳把酶蛋白分子分 离，然后对酶蛋白进行特异性染色，将其位置和活性直接用染色区带标记出来。目前， 50％以上的酶都发现了其同工酶的存在，可以进行分析的同工酶已达100多种。 利用同工酶标记来研究禾谷类锈菌的分类、致病力分化、毒性变异机制、起源与进化 以及群体遗传学已取得了长足进展。Burdon等”’61利用同工酶分析了澳大利亚的叶锈菌菌 株没有发现异质性；而北美地区叶锈菌株间的具有异质性，并根据这些多态性位点将该地 区小麦叶锈菌种群进行了分类，以同工酶表型对不同菌群的历史来源进行了推测，认为现 存于北美地区的小麦叶锈菌Est2a和Est2b类型是过去从其他地方传入的或一个传人后在 有发现异质性。 王凤乐等[81分析中国小麦条锈菌主要流行生理小种及美国小麦条锈菌白化菌系的同 工酶图谱。结果表明：中国小麦条锈菌不同生理小种具有同工酶表型异质性，而同一生理 小种群体内部可能具有同