dd病毒感染对免疫系统的影响.ppt

第25章病毒感染的检查方法与防治原则 第一节 病毒的诊断 病毒性感染的诊断有助于指导临床确诊、合理治疗以及为控制病毒性疾病的流行制定有效的措施。经典的病毒学诊断方法包括病毒的分离鉴定及血清学诊断。目前较常用的血清抗体IgM诊断虽具有快速、简便等优点，但诊断方法繁琐、费时。随着分子病毒学的发展而建立的一些快速诊断方法，极大的推动了病毒感染的诊断 一、标本的采取与送检 1.早期采集 采取病程初期或急性期的标本含病毒量多，易于检出；病程晚期机体已产生了抗体，病毒数量减少，检出率将显著降低 2.由感染部位采集 如呼吸道感染取鼻咽洗漱液或痰液；肠道感染取粪便；脑内感染取脑脊液(CSF)；发疹性疾病取疱疹内积液；有病毒血症者取血液 3.无菌操作 采取标本时，应注意无菌操作，但对本身带有杂菌 (如咽拭子、粪便) 或易受污染的标本，应使用抗生素。一般加青霉素、链霉素霉素(100μg/ml)，或根据需要加庆大霉素、二性霉素、制霉菌素等 4.标本应低温保存并尽快送检 病毒在室温中易失去活性，故采取标本后应立即送实验室，如标本需较长时间运送，可用保温瓶 (内放冰块和食盐，或固态二氧化碳和酒精) 存放。病变组织可放50%中性甘油中保存。若标本不能立即送检和作分离培养，应存放在－70℃冰箱或液氮罐内 5.血清学诊断标本的采取 应在发病初期和病后2-3w内各取1份血清，以便对比双份血清抗体效价的动态变化。血清抗体标本应保存在-20℃  二、病毒的分离与鉴定 由于病毒具有严格的细胞内寄生性，故应根据不同的病毒选用敏感动物、鸡胚或组织细胞培养等进行病毒的分离与鉴定。但因这些方法复杂、要求严格及需时较长，故不能广泛应用于临床诊断，只用于实验室研究或流行病学调查。当有下述情况时需进行病毒的分离与鉴定： (三) 检查病毒性抗原及抗体的方法 1 检测抗原：近年来，采用标记技术，即用荧光素、放射性同位素、过氧化物酶特异标记的抗体，检测标本中相应的抗原，如检测病毒感染局部脱落细胞或分泌物细胞中的抗原，也可用酶联免疫测定法或免疫测定ELISA或乳胶凝集法检测抗原。此方法具有敏感、特异、快速等优点。 四 检测病毒的核酸的方法 利用病毒基因作为探针用核酸杂交的方法检测标本中有无相应的病毒核酸 ，进行疾病的诊断 2 核酸扩增法 80年代中期，美国Cetus公司首创一种DNA扩增技术－PCR，这一技术能使pg水平的核酸在短时间内达到ng水平而被检出。近年来还发展了一系列以PCR为基础的其他体外核酸扩增技术。已被广泛应用于病毒性感染的诊断与研究中 一、抗病毒药物或制剂 病毒为严格细胞内寄生性微生物，所以，抗病毒药物必须对病毒有选择性抑制作用而又不损伤宿主细胞或机体。而且，一种理想的药物应是在控制临床症状同时不影响机体对病毒产生免疫应答。从理论上讲，病毒复制的任何一个环节都可以是抗病毒药物发挥作用的靶位置，但是要区别病毒复制与宿主细胞的正常生理过程确实是很困难的 第26章 呼吸道病毒 呼吸道病毒是指一大类能侵犯呼吸道局部或仅以呼吸道为侵入门户，主要引起呼吸道外组织器官病变的病毒 急性呼吸道感染中90%-95%是由病毒引起。比较重要和常见的病毒有正粘病毒科的流感病毒；副粘病毒科的副流感病毒、呼吸道合胞病毒、麻疹病毒、腮腺炎病毒以及其他病毒科的一些病毒，如鼻病毒、风疹病毒、冠状病毒、腺病毒和呼肠病毒等 在流感病毒的分离培养中最，敏感的而而特异的是鸡胚接种，，并用血凝和血凝抑制试验以 确定病毒。此外，细胞培养也可应用， 接种动物分离培养的方法目前很少应用，但狂犬病毒及乙型脑炎病毒的分离与鉴定中还需应用动物接种，并结合用特异抗体作中和试验或作免疫荧光染色以鉴定病毒种类 2 检测抗体：用病毒特异性抗原可以检测感染者血清中的IgM，检测病毒特异性IgM抗体可诊断急性感染，特别是IgM抗体的存在对证实孕妇感染风疹病毒尤为重。 另外，检测早期抗体可以快速诊断病原体 利用特异抗原检测IgG类抗体，则需早期和恢复期双份血清，且抗体效价4倍以上增高方有诊断意义。 此外，分子生物学检测技术、气相色谱技术等，均可用来分析和鉴定病毒感染  1 核酸杂交技术 双链DNA在高温及碱性溶液中，碱基对间的氢键被破坏，两链分