三维细胞培养技术在植物细胞研究中的应用进展.pdfVIP

现代农业科技 2011年第23期 农业基础科学 三维细胞培养技术在植物细胞研究中的应用进展 夏 兵 (南京林业大学理学院，江苏南京 210037) 摘要 介绍 了三维细胞培养技术(3Dcellcuhure)在植物细胞研究中的应用进展 ，包括三维细胞培养支架制备、基于微流控芯片的细胞 培养系统等 ．并对三维细胞培养技术在植物细胞研究中的应用前景进行 了展望。 关键词 三维细胞培养技术；植物细胞研 究；应用；进展 中图分类号 Q813．11 文献标识码 A 文章编号 lOO7-5739(2Ol1)23-oo11-o3 三维细胞培养技术(3Dcellculture)在组织形成 、血管 物细胞)和哺乳动物细胞有很多的相似之处 ，可以摄人细胞 发育和器官再造等发育生物学 的分支领域得到了广泛 的 器 、微粒体 、病毒以及 DNA等大分子物质 ，这就为将三维细 应用 ：同时在筛选新药的疗效分析和毒理试验方面 ，利用 胞培养技术 引入到原生质体培养中提供了可能性 。笔者根 三维培养获得了与二维单层培养完全不同的结果，引起了 据 已有文献检索 ，利用木本植物材料开展初步研究，对于 生命学家 的极大兴趣 【。不同于传统的二维单层细胞培养 ， 这方面研究中的应用前景作一评述。 三维细胞培养技术是指将具有三维结构不同材料的载体与 1 三维细胞培养支架制备 各种不同种类的细胞在体外共 同培养 ，使细胞能够在载体 三维细胞培养 的关键在于三维细胞培养支架制备(3D 的三维立体空间中迁移 、生长、构成三维的细胞一载体复合 cellculturescaffold，3DCCS)(图2)，其研究内容将涉及微加工 物。在真正的活体，细胞通常在三维环境中生长并建立三维 制造、生物偶联、表面化学修饰、软光刻制作、高分子合成、 活的组织或器官。细胞培养的微环境对于细胞的形状、代 细胞生物学等多个领域 。目前可用于制备 3D—CCS的材料 谢、功能、迁移、增殖和分化等具有至关重要的作用。传统 主要有聚苯乙烯(ps)、聚己内酯(PCL)、聚酰胺 (PA)、聚二 单层细胞培养 由于细胞在体外改变的环境下增生逐渐散失 甲基硅氧烷(PDMS)、硅片、玻璃、胶原蛋白或水凝胶等1【6-27]。 了原有的性状 ，往往与体内情况不相符 ；动物试验虽在体内 而相应的制备方法有 ：运用相分离法合成 的多孔高分子支 进行．但体内多种因素制约以及体 内和外界环境相互影响 架；利用电放纤维技术人工合成的纳米纤维支架 ；尤其是运 而不能观察到研究者最为关心的中间过程 。三维细胞培养 用精密微加工技术制备具有均一微结构的支架，其确保多 技术模拟体内的微环境 ，填补了单层细胞培养和动物试验 孔结构的可重复性 以及可调控性 ，并且可以和微流控技术 的鸿沟。正如 Nature中的一篇文章指 出：“意识到三维组织 相集成，开发新型的微流控三维细胞培养芯片。目前商业化 培养潜在 的优势的科学家还是太少了。但是 ，这项技术带 的3DCCS主要有英国Reinnervate公司的alvetex三维支架 来 的好处是不言而喻的(图 1)嗍。”三维细胞培养技术作为 (http：／／www．reinnervate．com)，其被 Scientist网站评为2010 体外无细胞系统及单层细胞系统的研究与组织器官及整 年的全球生物技术的十大革新之一，名列第6位(http：／／www． 体研究的桥梁 ，显示了其既能保 留体 内细胞微环境 的物质 the—scientist．corn／2010／12／14／7111)。另外，还有美国3DBiotek 及结构基础 。又能展现细胞培养的直观性及条件可控性的 公司的3DInsertMT三维支架 (http：／w／ww．3dbiotekstore．