丹参对小鼠炎症性肠病的治疗作用及机制的的的研究.pdfVIP

·中文论著摘要· 丹参对小鼠炎症性肠病的治疗作用及机制研究 刖 吾 bowel disease，IBD)是指一组病因尚不清楚的 炎症性肠病(inflammatory 慢性非特异性的肠道炎症性疾病，包括两个独立的疾病，溃疡性结肠炎 (ulcerativecolitis，Uc)和克罗恩病(Crohn’Sdisease，CD)。近年来IBD在 世界范围包括我国在内发病率持续增高，逐渐成为消化系统常见疾病和慢性腹泻 的主要病因。IBD具有慢性，持续性和复发性的特点，可发生中毒性巨结肠、肠 穿孔、肠出血、肠梗阻及大肠癌变，严重影响人民群众的生活健康，形成巨大的 社会经济负担。 IBD的病因学和治疗学研究一直是该领域的研究重点，目前大多数研究者认 为，该病的发病多与环境、遗传和免疫学因素有关，是一种多基因参与的作用于 免疫系统和靶器官的疾病，而免疫学因素在其发病过程中起至关重要的作用。近 年来的研究表明CD是一种典型的Thl型反应，而UC则是一种非典型的Th2型反 应，除免疫细胞外，肠道粘膜的非免疫细胞如上皮细胞、血管内皮细胞及间质细 胞等亦参与免疫反应和炎症过程，它们释放出各种细胞因子和炎症介质导致肠道 炎症的发生和发展，调节某些细胞因子的表达可以治疗IBD，如给予白介素 necrosisfactor (interleukin，IL)10治疗UC，给予抗肿瘤坏死因子Q(tumor Q，TNFQ)单克隆抗体治疗CD都取得较好的效果。 Thl和Th2细胞因子都会促进炎症的发生与发展，而调节性T细胞 T (regulatory 和适应性免疫反应都有抑制作用，在多种免疫性疾病中起重要调节作用。根据其 泌TGF—B和IL一10产生广泛非特异性的抑炎作用。而当Treg细胞功能紊乱和调 节缺陷时，肠黏膜局部就会产生持续的炎症反应，这可能是IBD的发病机制之一。 目前IBD的治疗主要从影响机体的免疫功能入手，治疗药物包括氨基水杨酸 制剂、糖皮质激素、免疫抑制剂、生物制剂和中药，不良反应严重或价格昂贵是 氨基水杨酸制剂、糖皮质激素、免疫抑制剂和生物制剂的不足之处，限制了其长 期应用，而中药相对而言不良反应轻，价格低廉，供应充足，可作为辅助用药， 提高疗效，减少常规治疗引起的不良反应。其中丹参是一种广泛应用的中药，常 用于治疗炎性肠病，机制不明。有研究表明分离正常人外周血淋巴细胞和单核细 胞，在体外培养中用人肠道厌氧茵抗原刺激单核细胞，然后将激活的单核细胞与 淋巴细胞混合培养，再加入丹参，检测发现CD4+细胞中CD25及Foxp3双阳细胞的百 分比明显升高，同时CD4+CD25+细胞中Foxp3的表达率也显著升高，丹参可能通过 维持调节性T淋巴细胞的分化平衡来发挥其治疗作用，但体内作用未有研究阐明， 本研究的目的是明确丹参对体内CD8+CD25+调节性T细胞分化及相关细胞因子表达 的影响，为丹参用于治疗IBD提供依据。 实验材料及方法 一、 动物模型及分组 医科大学附属盛京医院实验动物中心提供。根据腹腔注射药物的不同将BALB／C小 鼠用随机数字表法分为5组，每组10只，给予含1％(w／v)三硝基苯磺酸 (trinitrobenzenesulfonic 体重灌肠，建立炎症性肠病模型，造模成功后各组处置如下： A组：无处置； B组：生理盐水10ml／kg腹腔注射，连续14天； C组：2％丹参生理盐水10ml／kg腹腔注射，连续14天； D组：4％丹参生理盐水10ml／kg腹腔注射，连续14天； E组：6％丹参生理盐水10ml／kg腹腔注射，连续14天。 2 实验第8天和第15天麻醉处死动物，留取脾和结肠标本，其中死亡动物不列 入研究。 二、 实验标本采集及处理 造模后观察动物一般状况、粪便情况及称量体重，在第8天和第15天收集粪 便测定大便隐血分数，进行疾病活动度指数(disease index，DAI)评分。 ac